共聚焦拉曼影像顯微鏡快速共聚焦顯微拉曼光譜成像的意義:
共聚焦拉曼顯微鏡已經(jīng)廣泛應(yīng)用于物理,化學(xué),半導(dǎo)體,生物等各種研究領(lǐng)域。顯微拉曼光譜法可以對(duì)微區(qū)的樣品實(shí)現(xiàn)非接觸,無(wú)破壞性,無(wú)需樣品制備的分析測(cè)試,可以方便的判別此微區(qū)樣品的物理和化學(xué)性質(zhì)。隨著應(yīng)用的發(fā)展,微區(qū)拉曼光譜成像的需求快速增長(zhǎng)。微區(qū)拉曼光譜成像的好處是既可以得到光譜信息,同時(shí)又得到了空間二維甚至三維信息。
由于拉曼信號(hào)通常很微弱,當(dāng)用戶(hù)希望做拉曼光譜影像時(shí),往往由于時(shí)間問(wèn)題很難付諸實(shí)際,我們來(lái)做一個(gè)計(jì)算,對(duì)于某一個(gè)樣品,采集空間一點(diǎn)的拉曼光譜時(shí)間為1秒的話(huà),如果希望實(shí)現(xiàn)對(duì)空間128x128點(diǎn)每點(diǎn)均采集拉曼光譜的話(huà),需要時(shí)間為:
128*128=16,384秒=4.55小時(shí)
這對(duì)于實(shí)驗(yàn)者幾乎是無(wú)法接受的,
德國(guó)Witec公司出品的Alpha300-R快速共焦拉曼顯微鏡在優(yōu)化顯微鏡和光譜采集系統(tǒng)的同時(shí),還創(chuàng)新性的采用了EMCCD和平臺(tái)掃描同步采譜功能,可以在保證高信噪比的同時(shí)把單個(gè)空間點(diǎn)的采譜時(shí)間降到50ms以下甚至ms級(jí)別。這樣做同樣的一個(gè)拉曼光譜成像實(shí)驗(yàn),我們需要的時(shí)間是:
0.05*128*128=819.20秒=13.65分鐘
系統(tǒng)參數(shù):
激光器:442nm, 488nm,514nm,532nm,633nm,785nm 等可選,功率10-150mW(根據(jù)不同激光器)
光譜儀:300mm焦距,f/4;通光量 70%;600g/mm和1800g/mm光柵
EMCCD: 1600x200背感光深度制冷電子倍增型光譜CCD
基于Zeiss顯微鏡的共焦拉曼顯微鏡,空間分辨率可達(dá)200nm (采用532nm激光和油浸物鏡)
PZT掃描臺(tái),掃描范圍200x200x2-um;掃描準(zhǔn)確度4x4x0.5nm; 線(xiàn)性度好于0.02%
最大可裝載樣品直徑150mm;
標(biāo)準(zhǔn)測(cè)試模式:拉曼光譜,光譜vs時(shí)間,拉曼光譜影像XY, YZ; 3D成像
可實(shí)現(xiàn)原位原子力顯微鏡與共焦拉曼顯微鏡聯(lián)用
共聚焦拉曼影像顯微鏡