制備凝膠懸浮液
Sephadex LH-20在使用之前必須進(jìn)行溶脹。在溶脹的過程中，要盡量避免過分?jǐn)嚢?，否則會破壞球形膠粒，且要避免使用磁力攪拌器。
1． 在室溫下，將凝膠溶脹于層析溶劑中至少三小時，溶脹后膠體積的大小決定于所使用的溶劑系統(tǒng)，請參考后頁之干膠溶脹表計算特定柱體積所需要干膠的量。
2． 使溶脹膠體積沉淀之后占總體積的75%，上層溶劑占25%，這時，懸浮液從一個容器倒入另一容器時膠粒可移動。
3． 將溶脹后的凝膠根據(jù)裝柱要求均勻倒入柱內(nèi)，在保證膠粒不變形的前提下，應(yīng)在盡可能高的壓力下裝柱，反壓不要超過1.5ba。
平衡
上樣前，用洗脫液平衡層析柱至少兩個柱體積直到基線變得平穩(wěn)為止，如改變?nèi)軇?yīng)該注意凝膠在新溶劑中的溶脹性質(zhì)，并根據(jù)性質(zhì)確定柱高調(diào)節(jié)器的位置，如使用相同的溶劑，在以后的層析中柱平衡可以省略。
洗脫液
為確保延長層析柱的使用壽命，所有的緩沖液都應(yīng)該離心或經(jīng)過0.45um的膜過濾以除去雜質(zhì)。
樣品
樣品體積應(yīng)該占柱總體積的1-2%，同樣在使用之前樣品應(yīng)該離心或經(jīng)過0.45um的膜過濾。
洗脫
洗脫流速應(yīng)根據(jù)情況而定，zui大張性流速約12cm/min（反壓1.5ba），建議流速為1-10cm/h?？傮w來說，較低的流速，具有較高的分辯率。
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貨號 |
產(chǎn)品 |
包裝 |
顆粒度大?。╱m) |
性能/應(yīng)用 |
PH穩(wěn)定性工作（清洗） |
耐壓（pa) |
zui高流速（ch/m) |
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17-0090-10 |
Sephadex LH-20 |
25 g |
100-4000 |
干粉 |
膽固醇、脂肪酸、激素、維他命、 |
2-13 |
720 |
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17-0090-01 |
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100 g |
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18-111 |
天然產(chǎn)物 |
[2-13] |
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17-0090-02 |
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500 g |
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17-0090-03 |
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5 kg |
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