試劑盒反應(yīng)原理簡介:
Cell Counting Kit-8(CCK-8試劑盒)是檢測細(xì)胞增殖、細(xì)胞存活和細(xì)胞毒性的試劑盒,是一種基于水溶性四唑鹽的廣泛應(yīng)用快速高靈敏度檢測試劑盒,為MTT法的替代方法,試劑盒中采用水溶性四唑鹽在電子耦合試劑存在的情況下,可以被線粒體內(nèi)的一些脫氫酶還原生成橙黃色的formazan(參考圖1)。細(xì)胞增殖越多越快,則顏色越深;細(xì)胞毒性越大,則顏色越淺。對于同樣的細(xì)胞,顏色的深淺和細(xì)胞數(shù)目呈良好線性關(guān)系。
CCK-8是MTT的一種升級產(chǎn)品,和MTT或其它MTT類似產(chǎn)品如XTT、MTS等相比有明顯的優(yōu)點。第一,MTT被線粒體內(nèi)的一些脫氫酶還原生成的formazan不是水溶性的,需要有特定的溶解液(如DMSO等)來溶解;而CCK-8和XTT、MTS產(chǎn)生的formazan都是水溶性的,可以省去后續(xù)的溶解步驟,減少誤差。其次,CCK-8產(chǎn)生的formazan溶解度遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于XTT和MTS產(chǎn)生的formazan。第三,CCK-8比XTT和MTS更加穩(wěn)定,使實驗結(jié)果更加穩(wěn)定。另外,CCK-8和MTT、XTT等相比線性范圍更寬,靈敏度更高。Yuanyuanbiotech研制的CCK-8試劑盒全部采用高純原裝進口原料,經(jīng)過至少35種細(xì)胞檢測其OD值與細(xì)胞數(shù)目的線性關(guān)系(r2>0.98)且無細(xì)胞毒性。
CCK-8試劑盒