A:打開高壓輸液泵,首先用甲醇沖洗(包括清洗和啟動(dòng)泵),在這個(gè)時(shí)間內(nèi)去配制流動(dòng)相,配流動(dòng)相時(shí)注意有機(jī)溶劑(色譜純)和水(二次蒸餾水)分別用油膜和水膜過濾,然后混合放在超聲波清洗器中脫氣15min。
清洗步驟:首先逆時(shí)針旋轉(zhuǎn)排空閥180度,按清洗,5min后停止,再旋轉(zhuǎn)回來。
B:停泵換上5%甲醇水溶液(常備)沖洗(包括清洗和啟動(dòng)泵),停泵再換上流動(dòng)相沖洗(包括清洗和啟動(dòng)泵),流量是1ml/min即可。
注意:清洗時(shí)需要旋開排空閥,啟動(dòng)泵時(shí)關(guān)閉排空閥。
C:打開紫外檢測(cè)器,初始化完畢后退出,進(jìn)入定波長(zhǎng)時(shí)間掃描方式在參數(shù)設(shè)置里設(shè)置檢測(cè)波長(zhǎng)退出,并點(diǎn)擊開始(查看基線)。
D:打開在線工作站,填寫實(shí)驗(yàn)信息后,在數(shù)據(jù)采集中查看基線,電壓范圍為—10——100即可,基線平穩(wěn)且氘燈預(yù)熱半小時(shí)后即可進(jìn)樣。
E:基線平穩(wěn)時(shí)間內(nèi)進(jìn)行樣品處理,樣品最后要用針頭式過濾器過濾(注意油膜和水膜)。
F:進(jìn)樣順序:首先把進(jìn)樣閥旋至load位置,用平頭微量進(jìn)樣器吸取多于20ul的樣品,充分插入進(jìn)樣閥進(jìn)樣,旋進(jìn)樣閥至inject位置拔出進(jìn)樣器。
G:工作站自動(dòng)采集數(shù)據(jù)完畢后停止采集,保存數(shù)據(jù)到適當(dāng)位置,在方法的譜圖顯示中調(diào)適當(dāng)?shù)碾妷悍秶?,預(yù)覽打印即可。然后進(jìn)另一批次的樣品。
H:實(shí)驗(yàn)完畢后,首先把檢測(cè)器退出關(guān)閉,半小時(shí)后,停泵換上5%甲醇水溶液沖洗(包括清洗和啟動(dòng)泵),停泵再用色譜甲醇沖洗(包括清洗和啟動(dòng)泵)至高壓輸液泵壓力穩(wěn)定即可停泵關(guān)閉。
I:注意 需要檢測(cè)溫度時(shí)需打開柱溫箱設(shè)置溫度。
流動(dòng)相中不含緩沖鹽時(shí)可以省略5%甲醇水溶液的過渡。
色譜柱長(zhǎng)時(shí)間不用時(shí)卸下來用堵頭堵住兩頭密封保存。
清洗步驟:首先逆時(shí)針旋轉(zhuǎn)排空閥180度,按清洗,5min后停止,再旋轉(zhuǎn)回來。
B:停泵換上5%甲醇水溶液(常備)沖洗(包括清洗和啟動(dòng)泵),停泵再換上流動(dòng)相沖洗(包括清洗和啟動(dòng)泵),流量是1ml/min即可。
注意:清洗時(shí)需要旋開排空閥,啟動(dòng)泵時(shí)關(guān)閉排空閥。
C:打開紫外檢測(cè)器,初始化完畢后退出,進(jìn)入定波長(zhǎng)時(shí)間掃描方式在參數(shù)設(shè)置里設(shè)置檢測(cè)波長(zhǎng)退出,并點(diǎn)擊開始(查看基線)。
D:打開在線工作站,填寫實(shí)驗(yàn)信息后,在數(shù)據(jù)采集中查看基線,電壓范圍為—10——100即可,基線平穩(wěn)且氘燈預(yù)熱半小時(shí)后即可進(jìn)樣。
E:基線平穩(wěn)時(shí)間內(nèi)進(jìn)行樣品處理,樣品最后要用針頭式過濾器過濾(注意油膜和水膜)。
F:進(jìn)樣順序:首先把進(jìn)樣閥旋至load位置,用平頭微量進(jìn)樣器吸取多于20ul的樣品,充分插入進(jìn)樣閥進(jìn)樣,旋進(jìn)樣閥至inject位置拔出進(jìn)樣器。
G:工作站自動(dòng)采集數(shù)據(jù)完畢后停止采集,保存數(shù)據(jù)到適當(dāng)位置,在方法的譜圖顯示中調(diào)適當(dāng)?shù)碾妷悍秶?,預(yù)覽打印即可。然后進(jìn)另一批次的樣品。
H:實(shí)驗(yàn)完畢后,首先把檢測(cè)器退出關(guān)閉,半小時(shí)后,停泵換上5%甲醇水溶液沖洗(包括清洗和啟動(dòng)泵),停泵再用色譜甲醇沖洗(包括清洗和啟動(dòng)泵)至高壓輸液泵壓力穩(wěn)定即可停泵關(guān)閉。
I:注意 需要檢測(cè)溫度時(shí)需打開柱溫箱設(shè)置溫度。
流動(dòng)相中不含緩沖鹽時(shí)可以省略5%甲醇水溶液的過渡。
色譜柱長(zhǎng)時(shí)間不用時(shí)卸下來用堵頭堵住兩頭密封保存。