將樣品上樣到預(yù)處理過的SPE柱；
  在加入適當(dāng)量的洗脫液，靜置片刻，同步完成蛋白沉淀與分析物的提?。?BR>  加壓，使洗脫液勻速流過柱子，接收全部流出液；
  接收液進(jìn)行后處理或直接檢測。
 MAS還有離心管形式

     將樣品及提取溶劑同時放入離心管中，震蕩或超聲提取；
     加入SPE填料吸附凈化樣品基質(zhì)干擾，離心后檢測目標(biāo)物被留在了溶液里。
     取上清液進(jìn)行后處理或直接檢測。

與常規(guī)的SPE方法相比，MAS法有很多的優(yōu)點，尤其在藥物代謝分析領(lǐng)域中血漿樣品一般都采用直接蛋白沉淀法和常規(guī)SPE法來進(jìn)行樣品前處理，其中蛋白直接沉淀更多的偏重于血漿樣品中大分子蛋白的去除，與其相較，SPE可以更好的去除小分子蛋白

圖1是比較了蛋白直接沉淀，常規(guī)SPE及MAS方法處理過的牛血清空白樣品的色譜圖，由圖中可以看出，常規(guī)SPE處理過的血清樣品色譜圖2.5分鐘前的雜質(zhì)峰更少，而在2.5分鐘后卻又有兩個明顯的色譜干擾峰。正是證明了SPE對于大分子物質(zhì)去除的更好，而對于某些小分子蛋白卻無法徹底的清除。

圖1  MAS方法與常規(guī)SPE及蛋白直接沉淀法蛋白去除效果比較色譜圖

藍(lán)色為直接蛋白沉淀；綠色為HLB凈化；粉色為MAS柱管形式凈化；墨綠色為MAS離心管形式凈化

     MAS方法的開發(fā)正是為了解決這一問題，可以看到，MAS方法處理過的樣品色譜圖在2.5分鐘后幾乎沒有任何干擾，而在2.5分鐘前的干擾峰也比直接蛋白沉淀方法有了明顯的減少。這是因為MAS方法同時結(jié)合了蛋白沉淀與SPE吸附，酸化乙腈既作為蛋白沉淀劑又等同于提取液，且方法簡單，快速，便于操作，實驗證明對于血漿中的雷尼替丁有很好的添加回收率。同時通過質(zhì)譜掃描磷脂的特征離子，如圖2可以看出比較蛋白直接沉淀方法和反相SPE方法，磷脂特征離子的響應(yīng)值有一至兩個數(shù)量級的減小。

圖2  一級質(zhì)譜掃描圖m/z=496 特征離子比較