前段時間,據(jù)《重慶商報》報道,接國家工商總局、衛(wèi)生部等4部委聯(lián)合通知,重慶市工商、質(zhì)監(jiān)等部門抽查當(dāng)?shù)鼗疱伒琢系日{(diào)味品質(zhì)量后發(fā)現(xiàn),王牌麻辣魚調(diào)料等5個廠家10個批次的調(diào)味產(chǎn)品都含有工業(yè)染料“羅丹明B”(商品名為“玫瑰紅B”),這些調(diào)味產(chǎn)品多為麻辣調(diào)味料。
一.“羅丹明B”簡介
據(jù)了解,問題火鍋底料里查出的工業(yè)染料“羅丹明B”主要來自生產(chǎn)底料所用的豆瓣里。加入這種物質(zhì)后的豆瓣色澤紅潤,賣相好,很吸引消費者?!傲_丹明B”(商品名為玫瑰紅B)為工業(yè)染料,又稱若丹明B,是一種具有鮮桃紅色的人工合成的染料。英文名Rhodamine B.分子量479.0175。羅丹明B在溶液中有強烈的熒光, 用作實驗室中細(xì)胞熒光染色劑、有色玻璃、特色煙花爆竹等行業(yè)。曾經(jīng)用作食品添加劑,但后來實驗證明羅丹明B會致癌,現(xiàn)在已不允許用作食品染色。
二.月旭的全套解決方案
1.適用范圍
適用于辣椒面中羅丹明 B的測定。
2.提取
精確稱取1g 辣椒面于50 mL聚丙烯離心管中,加入20 mL丙酮:正己烷(20:80)混合溶液,300 rpm振蕩10 min,4000 rpm離心5 min,轉(zhuǎn)移上清液于50 mL離心管中,殘渣重復(fù)提取一次,合并上清液,于40℃氮吹至10 mL左右,待凈化。
3.凈化
預(yù)處理:向Welchrom Alumina-N(500mg/6mL)中加入5 mL丙酮:正己烷(20:80)混合溶液,流出液棄去;
上樣:將上述提取液加入柱中,流出液棄去,此時,含羅丹明B的樣品在柱上部會出現(xiàn)鮮亮的粉紅色的熒光條帶,條帶邊緣清晰,粉紅色隨含量的增加而加深和加寬,不含羅丹明B的樣品提取液不會出現(xiàn)粉紅色條帶,只會出現(xiàn)黃紅色的界面不清晰的寬帶;
淋洗:加入含有20%丙酮的正己烷溶液淋洗SPE柱,可見柱體上的黃紅色條帶下移,直到黃色條帶洗出柱體為止;
洗脫:5 mL甲醇:水(90:10)洗脫(不同活度的氧化鋁選擇的洗脫液不一樣,Welchrom Alumina-N為Beckman Ⅰ級,采用純甲醇洗脫時,需要大量的洗脫液才能將羅丹明B 洗脫下來,故在此加入10%的水以提高洗脫強度);
重新溶解:采用90%甲醇水溶液定容至5 mL,過0.22μm濾膜,裝瓶待分析;
4.檢測
色譜條件:
色譜柱: Topsil C18 液相色譜柱(4.6 mm x 250 mm, 5 μm)
流動相: 甲醇:水=75:25
流速: 1 mL/min
進樣量: 20 μL
柱溫: 40°C
檢測波長: 554 nm
運行時間:11 min
5.結(jié)果
回收率和重現(xiàn)性實驗
將空白辣椒面上述方法處理后,分別添加一定量的標(biāo)準(zhǔn)溶液,添加濃度分別為0.2 mg/kg、0.5 mg/kg、2 mg/ kg、每批次內(nèi)同一濃度做3次平行實驗,共3個批次(樣品典型回收率色譜圖見附圖)。
6.附圖
辣椒面中添加0.5 mg/kg 羅丹明B色譜圖
Welchrom Alumina-N上樣后圖片
本方法中使用到得耗材:
1.固相萃取小柱 Welchrom Alumina-N 500mg/6mL (P/N:WSAN010605)
2.色譜柱:Topsil, 4.6*250 mm,5μm(P/N: Tp5B18425)
3.13mm,孔徑0.22μm尼龍針孔濾膜(P/N: WEL-SFNY213022)