瘦肉精是一類(lèi)動(dòng)物用藥,它可以起到減少脂肪增加瘦肉的作用。目前在中國(guó)瘦肉精主要為克侖特羅(clenbuterol),它屬于β-興奮劑(β-agonist)藥物。克侖特羅有很危險(xiǎn)的副作用,輕則導(dǎo)致心律不整,重則導(dǎo)致心臟病發(fā)作。
目前檢測(cè)瘦肉精的技術(shù)主要包含膠體金法、高效液相色譜(HPLC)、液質(zhì)聯(lián)用等方法。其中膠體金法以其快速、簡(jiǎn)單、便利等優(yōu)點(diǎn),日益成為一種重要的方法。
膠體金技術(shù)(Immune colloidal gold technique) 是以膠體金作為示蹤標(biāo)志物應(yīng)用于抗原抗體的一種免疫標(biāo)記技術(shù)。膠體金是由氯金酸(HAuCl4)在還原劑如白磷、抗壞血酸、枸櫞酸鈉、鞣酸等作用下,聚合成為特定大小的金顆粒,并由于靜電作用成為一種穩(wěn)定的膠體狀態(tài)。
根據(jù)不同的還原劑可以制備大小不同的膠體金顆粒。常用來(lái)制備膠體金顆粒的方法如下:
1.白磷還原法
2.枸櫞酸三鈉還原法。
3.鞣酸—枸櫞酸鈉還原法。
純水在膠體金生產(chǎn)過(guò)程中的重要性:
1.水中的離子雜質(zhì)會(huì)改變pH值及離子強(qiáng)度。pH值對(duì)最終的顆粒大小有一定的影響。溶液的顏色和其pH值相關(guān)聯(lián)。離子強(qiáng)度影響膠體金與蛋白質(zhì)的成功結(jié)合,或?qū)е履z體金粒子的凝聚,降低膠體金的檢測(cè)能力。
不同金顆粒大小對(duì)溶液顏色的影響
2.有機(jī)物除了可能改變pH值外,還會(huì)與蛋白質(zhì)形成結(jié)合體。或者不穩(wěn)定容易失活,或者影響探針的靈敏度。干擾蛋白-金復(fù)合體的制備。
3.顆粒會(huì)干擾膠體金顆粒的生成,形成的顆粒大小不一,顏色微紅、無(wú)色或混濁不透明。
好的膠體金 渾濁的膠體金
微生物會(huì)產(chǎn)生代謝產(chǎn)物,并且微生物死亡時(shí)細(xì)胞裂解也會(huì)產(chǎn)生大量雜質(zhì)。帶來(lái)諸如顆粒,有機(jī)物,離子等各種雜質(zhì),從各方面影響膠體金。
因此,制備膠體金務(wù)必使用有品質(zhì)保證的超純水。必須使用離子交換樹(shù)脂去除離子,使用活性炭及紫外燈去除有機(jī)物,使用膜過(guò)濾去除顆粒及微生物等等。