1、冷凍管應(yīng)如何解凍?
取出冷凍管后,須立即放放37℃水槽中快速解凍,輕搖冷凍管使其在1分鐘內(nèi)全部融化,并注意水面不可以超過(guò)冷凍管蓋沿,否則易發(fā)生污染情形。另外凍管由液氨桶中取出解凍時(shí),必須注意安全,預(yù)防冷凍管之爆裂。
2、可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?
不能。每一細(xì)胞株均有其特定使用自己適應(yīng)之細(xì)胞培養(yǎng)基,若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同的之培養(yǎng)基,細(xì)胞大都無(wú)法立即適應(yīng),造成細(xì)胞無(wú)法存活。
3、可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類(lèi)?
不能。血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個(gè)極為重要的營(yíng)養(yǎng)來(lái)源,所以血清的種類(lèi)和品質(zhì)對(duì)于細(xì)胞的生長(zhǎng)會(huì)產(chǎn)品極大的影響。來(lái)自不同特種的血清,在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同,血清使用錯(cuò)誤常會(huì)造成細(xì)胞無(wú)法存活。
4、懸浮性細(xì)胞應(yīng)如何繼代處理?
一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中,稀釋細(xì)胞濃度即可,若培養(yǎng)液太多時(shí),可將培養(yǎng)角瓶口端稍微抬高,直到無(wú)法容納為止。分瓶時(shí)取出一部份含細(xì)胞之培養(yǎng)液至另一新的培養(yǎng)角瓶,加入新鮮培養(yǎng)基稀釋至適當(dāng)濃度,重復(fù)前述步驟即可。
5、欲將一般動(dòng)物細(xì)胞離心下來(lái),其離心速率應(yīng)為多少轉(zhuǎn)速?
欲回收動(dòng)物細(xì)胞,其離心速率一般為300xg(約1,000rpm),5-10分鐘,過(guò)高之轉(zhuǎn)速,將造成細(xì)胞死亡。
6、如果細(xì)胞發(fā)生微生污染時(shí),應(yīng)如何處理?
加入相應(yīng)抗生素。直接滅菌后丟棄。
7、各種細(xì)胞培養(yǎng)用的dish,flash是否均相同?
不同廠牌的dish或flash,其所coating的polymer不同,制造程序亦不同,雖對(duì)大部分細(xì)胞沒(méi)有太大之影響,惟少數(shù)則可能因使用廠牌不同之dish或flask而有顯著之生長(zhǎng)差異。