答：除非在產(chǎn)品說明書中特別注明，PeproTech的所有產(chǎn)品均為凍干粉，它們?cè)谑覝貤l件下非常穩(wěn)定(至少1個(gè)月)。盡管如此，我們還是建議您在收到我們的產(chǎn)品后保存于-20oC，以確保蛋白100%的活性。
對(duì)于大多數(shù)蛋白，重懸后在4oC僅能短期保存(約1周)。如想長(zhǎng)期保存，請(qǐng)先配制成稀釋液(其中必須含有載體蛋白，如0.1% BSA，5%HSA，或10% FBS)，然后分裝凍存于-20oC或-80oC。一定要避免反復(fù)凍融，因每次凍融均會(huì)引起蛋白的部分失活。
具體、詳細(xì)的重懸和溶解方法請(qǐng)點(diǎn)擊查看。
2．為什么有時(shí)在管中看不到細(xì)胞因子或蛋白的凍干粉？
答： 與市場(chǎng)上的許多蛋白產(chǎn)品不同，PeproTech的產(chǎn)品中均不含載體蛋白或其它添加物(如牛血清白蛋白(BSA)，人血清白蛋白(HSA)和蔗糖等，并且是以最低含鹽量的溶液進(jìn)行凍干的，因此凍干后常常不能形成白色網(wǎng)架結(jié)構(gòu)，而是微量的蛋白在凍干過程中沉積在管內(nèi)，形成很薄或肉眼不可見的透明蛋白層。
打開管蓋前，我們建議您在小離心機(jī)中快速離心20-30秒，使附著在管蓋或管壁上的蛋白聚集于管底。我們的質(zhì)控步驟保證每管中所含的蛋白量準(zhǔn)確無誤，雖然有時(shí)您無法看到蛋白粉末，但管中的蛋白含量仍是非常精確的。
3．ED50和units/mg之間有何關(guān)聯(lián)？
答： ED50為半數(shù)有效濃度，其定義是可誘導(dǎo)50%最大反應(yīng)的細(xì)胞因子濃度，這種活性表示法僅適用于劑量反應(yīng)曲線呈S形的細(xì)胞因子。其實(shí)，可以將ED50的值接理解為1unit。如某種細(xì)胞因子或蛋白的ED50為1ng/ml，那么1ng/ml即可看作是1unit。那么我們也不難理解，1mg (1x106ng) 該細(xì)胞因子或蛋白中應(yīng)含1x106/1 = 106units.
ED50(ng/ml)轉(zhuǎn)化為units/mg的公式如下：
4．如何確定細(xì)胞因子的種屬交叉活性？
答：1) 除少數(shù)例外，大多數(shù)人類細(xì)胞因子對(duì)小鼠細(xì)胞均有活性。2) 許多小鼠細(xì)胞因子也可作用于人類細(xì)胞，但比活性可能低于對(duì)應(yīng)的人類細(xì)胞因子。 3) IL-7等為數(shù)不多的人類細(xì)胞因子作用于小鼠細(xì)胞時(shí)比對(duì)應(yīng)的小鼠細(xì)胞因子活性更強(qiáng)。4) 干擾素，GM-CSF, IL-3和IL-4等細(xì)胞因子種屬特異，對(duì)非同源細(xì)胞幾乎沒有活性。5) 相反，成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(FGFs)和神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)素(neurotrophins)高度保守，在不同動(dòng)物種屬細(xì)胞上均具有很好的活性。
當(dāng)然，僅憑以上規(guī)律無法判斷許多其它細(xì)胞因子的交叉反應(yīng)活性。如您在這方面存在疑問，請(qǐng)與PeproTech中國(guó)代表處聯(lián)系，電話：0512-6832 5993，Email：china@peprotechasia.com，我們會(huì)給您準(zhǔn)確的答復(fù)。
5．到底什么是無動(dòng)物成分(Animal-Free)的重組蛋白？
答：誠(chéng)然，PeproTech生產(chǎn)的重組蛋白均是人或小鼠和大鼠的，又怎么說成是Animal-Free，即無動(dòng)物成分的呢？真正的原因是：這里的Animal-Free是指在表達(dá)人、小鼠或大鼠的重組蛋白的過程中未使用任何動(dòng)物來源的材料，而不是指被表達(dá)的重組蛋白是Animal-Free的。我們知道，重組蛋白通常是用大腸桿菌表達(dá)的，而大腸桿菌的培養(yǎng)基中需要添加胰蛋白胨(Trypton)等動(dòng)物來源的組分，這些組分不可避免的在隨后表達(dá)出來的重組蛋白中摻入諸多不明的動(dòng)物成分。雖然最后純化出來的重組蛋白的純度可達(dá)98%或99%，但另外1%中很可能含有來自胰蛋白胨的其它動(dòng)物成分，這些動(dòng)物成分雖然含量極微，但可能在重組蛋白應(yīng)用于人體或動(dòng)物時(shí)，將其中所含動(dòng)物病原體(如瘋牛病病毒及其它未知病原體)傳染給人和動(dòng)物。而且，這些動(dòng)物成分中的異源蛋白也會(huì)引起人和動(dòng)物的異體排斥或過敏反應(yīng)。因此，當(dāng)重組蛋白在應(yīng)用過程中可能接觸到人體或動(dòng)物體時(shí)(如細(xì)胞治療和動(dòng)物體內(nèi)實(shí)驗(yàn)等)，請(qǐng)盡量選用Animal-Free的重組蛋白。
PeproTech的無動(dòng)物成分重組蛋白是在獨(dú)立的完全無動(dòng)物成分的生產(chǎn)車間中生產(chǎn)出來的，同時(shí)生產(chǎn)過程中不會(huì)使用到胰蛋白胨等任何含動(dòng)物成分的培養(yǎng)基或試劑，因此可保證最終的重組蛋白中不含任何動(dòng)物成分，非常適合于臨床前試驗(yàn)和動(dòng)物研究。
PeproTech的無動(dòng)物成分產(chǎn)品的產(chǎn)品編號(hào)均以AF為前綴。PeproTech現(xiàn)已有44種無動(dòng)物成分的人、小鼠和大鼠重組蛋白，并在不斷快速增加。而且有些常用的細(xì)胞因子，如人EGF(表皮生長(zhǎng)因子)已經(jīng)完全采用無動(dòng)物成分的生產(chǎn)方式，即不再提供含動(dòng)物成分的人EGF。
