該項(xiàng)目針對(duì)目前使用較廣泛的有機(jī)砷、有機(jī)汞獸藥和有機(jī)錫農(nóng)藥,采用的是兩種最先進(jìn)的元素形態(tài)分析聯(lián)用技術(shù),方法研制成功,滿足了國(guó)內(nèi)及進(jìn)出口檢驗(yàn)工作需要,同時(shí),這一高難度檢驗(yàn)方法的研制還顯示了檢驗(yàn)檢疫部門高水平的檢測(cè)技術(shù),填補(bǔ)了國(guó)內(nèi)的技術(shù)空白。
課題組成員正在進(jìn)行試驗(yàn)操作
微生物實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)人員進(jìn)行食品微生物項(xiàng)目無菌操作
在現(xiàn)代化食品生產(chǎn)過程中,農(nóng)、獸藥,重金屬、致病菌污染食品,危害人類健康。在食品安全中當(dāng)前急需解決的問題有農(nóng)、獸藥,致病菌以及未獲審批的轉(zhuǎn)基因玉米的檢測(cè)方法的建立。
隨著世界貿(mào)易的快速發(fā)展和各國(guó)對(duì)食品安全問題的進(jìn)一步關(guān)注,日本肯定列表中對(duì)有機(jī)砷獸藥(硝苯砷酸和洛克沙砷)以及有機(jī)錫類農(nóng)藥(三唑錫、三環(huán)錫、三苯錫和苯丁錫)要求檢測(cè)。美國(guó)FDA也要求對(duì)動(dòng)物產(chǎn)品中的有機(jī)砷殘留進(jìn)行檢測(cè)。二硝基苯胺類除草劑已被瑞典禁止注冊(cè),丹麥于1998年也已經(jīng)禁止了氟樂靈的使用,其他國(guó)家也相應(yīng)制定了二硝基苯胺類除草劑最高殘留限量。而阪崎桿菌引發(fā)的腦膜炎、敗血癥和壞死性小腸結(jié)腸炎的病例在全球范圍內(nèi)相繼出現(xiàn),僅在2004年的上半年就召開了兩次關(guān)于嬰兒配方奶粉中阪崎腸桿菌的全球及區(qū)域性會(huì)議,研討乳品中阪崎腸桿菌的污染、污染源及檢測(cè)方法等問題。
這些國(guó)家對(duì)未經(jīng)過安全評(píng)價(jià)的轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品實(shí)施零允許量。因此,非常迫切需要解決食品安全中的關(guān)鍵因子的檢測(cè)方法研究。加強(qiáng)食品的安全衛(wèi)生檢測(cè),是保證人們健康,改善人們生活的必要手段。
近十年來,我國(guó)相繼引進(jìn)了國(guó)外較先進(jìn)的儀器設(shè)備,并積極采用先進(jìn)的樣品前處理技術(shù),使得我國(guó)在食品安全因子的檢測(cè)技術(shù)領(lǐng)域發(fā)展很快,在許多方面已達(dá)到國(guó)際水準(zhǔn)。但從整體來看,我國(guó)的相應(yīng)檢測(cè)技術(shù)與發(fā)達(dá)國(guó)家相比,仍然非常落后。因此,我國(guó)在相關(guān)領(lǐng)域的前瞻性探索以及應(yīng)用性研究任重而道遠(yuǎn),開展《食品安全關(guān)鍵因子的新型檢測(cè)技術(shù)研究與應(yīng)用》的研究工作,旨在加快食品安全因子檢測(cè)的相關(guān)新技術(shù)的研究開發(fā),增強(qiáng)自主創(chuàng)新能力,推動(dòng)我國(guó)相關(guān)領(lǐng)域的檢測(cè)水平盡早與國(guó)際接軌,適應(yīng)現(xiàn)實(shí)的需求。
該項(xiàng)目以食品安全關(guān)鍵因子檢測(cè)的相關(guān)新技術(shù)的研究開發(fā)為主線,針對(duì)食品中有代表性的安全因子,在有害元素、農(nóng)藥殘留、致病菌及轉(zhuǎn)基因檢測(cè)4個(gè)方面建立了相應(yīng)的新型檢測(cè)技術(shù)。該項(xiàng)目在結(jié)題后實(shí)現(xiàn)了大量技術(shù)創(chuàng)新,部分技術(shù)和成果達(dá)到國(guó)際領(lǐng)先水平,彌補(bǔ)了國(guó)內(nèi)技術(shù)空白。在國(guó)內(nèi)外核心期刊上共發(fā)表論文9篇,申請(qǐng)專利5項(xiàng),制定檢驗(yàn)檢疫行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)3項(xiàng)。
本項(xiàng)目針對(duì)目前使用較廣泛的有機(jī)砷、有機(jī)汞獸藥和有機(jī)錫農(nóng)藥,采用的是兩種最先進(jìn)的元素形態(tài)分析聯(lián)用技術(shù),方法總體水平達(dá)到國(guó)際先進(jìn)水平,此課題為有關(guān)部門提供了一個(gè)可靠的檢驗(yàn)手段和依據(jù)。另外,本研究采取的檢測(cè)手段可以為其他元素形態(tài)分析方法提供參考,檢測(cè)方法也可以給系統(tǒng)內(nèi)外有關(guān)試驗(yàn)用以參照。研究過程中形成的標(biāo)準(zhǔn)已經(jīng)成為檢驗(yàn)檢疫行業(yè)標(biāo)準(zhǔn),這就意味著全國(guó)32個(gè)直屬局及其分支局只要進(jìn)行這些項(xiàng)目的檢測(cè)就必須采用這些標(biāo)準(zhǔn)。因此其社會(huì)效益顯著。
該項(xiàng)目研究建立的不對(duì)稱引物恒溫?cái)U(kuò)增法在靈敏度、特異性和檢測(cè)范圍等指標(biāo)上相當(dāng)于或優(yōu)于PCR技術(shù),檢測(cè)成本遠(yuǎn)低于熒光定量PCR 技術(shù),尤其適合現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)的需要。實(shí)驗(yàn)裝置簡(jiǎn)單,僅需要普通水浴鍋或者其他得到穩(wěn)定熱源的設(shè)備即可;結(jié)果觀察客觀且不需使用電泳儀等設(shè)備,只需要通過試紙條的顯色即可進(jìn)行結(jié)果判讀,簡(jiǎn)單、快速。總體而言,是一種既有PCR反應(yīng)的高通量、高靈敏度,又具有免疫學(xué)檢測(cè)的特異性好、操作簡(jiǎn)便又不需要任何復(fù)雜儀器的快速檢測(cè)方法。從而使得有關(guān)的檢測(cè)工作能在口岸快速篩查、基層或偏遠(yuǎn)經(jīng)濟(jì)不發(fā)達(dá)地區(qū)順利開展,為出入境病原微生物檢測(cè)方法體系的建立提供一種新的手段,為口岸快速篩查病原菌,及時(shí)發(fā)現(xiàn)問題解決問題提供技術(shù)支持。
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研究重點(diǎn)
元素形態(tài)檢測(cè)。以HPLC-ICP-MS聯(lián)用技術(shù),同時(shí)檢測(cè)動(dòng)物源性食品中的阿散酸、硝苯砷酸、洛克沙砷殘留量;采用酸、堿提取液提取樣品中的硫柳汞,以HPLC-AFS聯(lián)用技術(shù)來檢測(cè)其含量。
農(nóng)藥殘留檢測(cè)。根據(jù)二硝基苯胺類除草劑的特性及植物源性食品中殘留限量選擇合適的檢測(cè)方法,并結(jié)合靈敏度和多殘留檢測(cè)的要求對(duì)不同基質(zhì)進(jìn)行相應(yīng)的前處理步驟的摸索,最終確立植物源性食品中二硝基苯胺類除草劑多殘留檢測(cè)方法。
致病菌及轉(zhuǎn)基因檢測(cè)。建立了一種新型阪崎腸桿菌快速篩選檢測(cè)方法——不對(duì)稱引物恒溫?cái)U(kuò)增法結(jié)合免疫金標(biāo)檢測(cè)方法;使用一種快速簡(jiǎn)便,靈敏度高,特異性強(qiáng)的環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增技術(shù),檢測(cè)轉(zhuǎn)基因玉米MIR604,MON890034和3272。
成果創(chuàng)新
■采用了兩種先進(jìn)的元素形態(tài)分析聯(lián)用技術(shù)(HPLC-ICP-MS和HPLC-AFS),提高了元素形態(tài)分析的能力。
■改進(jìn)優(yōu)化了二硝基苯胺類除草劑提取、凈化技術(shù),在食品基質(zhì)中建立了十二種二硝基苯胺類除草劑的同時(shí)檢測(cè)方法。
■建立了不對(duì)稱引物恒溫?cái)U(kuò)增法。在靈敏度、特異性和檢測(cè)范圍等指標(biāo)上相當(dāng)于或優(yōu)于PCR技術(shù),檢測(cè)成本遠(yuǎn)低于熒光定量PCR技術(shù),尤其適合現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)的需要。
■在檢測(cè)結(jié)果觀察上利用免疫金標(biāo)檢測(cè)技術(shù),避免環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增使用肉眼觀察沉淀的不客觀性,PCR需要電泳觀察及熒光PCR對(duì)儀器的依賴,在10至15分鐘內(nèi)就可呈現(xiàn)出清晰的條帶,使核酸擴(kuò)增物的檢測(cè)周期大大縮短。