與干細胞一樣,癌細胞也能夠無限增殖。越來越多的證據(jù)表明,就增殖和分化而言,腫瘤細胞的克隆種群表現(xiàn)出明顯的異質(zhì)性,癌細胞是由表現(xiàn)出干細胞特征的細胞產(chǎn)生的。這個一部分細胞推動腫瘤產(chǎn)生的假說表明,干細胞樣癌細胞群體的靶向清除是一種可行的治療策略。在一些病例中,缺乏癌癥干細胞群體特有的標(biāo)志物,因此須采用陽性和陰性標(biāo)志物來鑒定這些細胞。
R&D Systems提供了一些專為分離腫瘤相關(guān)細胞群而設(shè)計的試劑盒,包括乳腺癌干細胞分離試劑盒,以及其他多個試劑盒,它們可分離表達特定癌癥相關(guān)標(biāo)志物的細胞。
乳腺癌干細胞分離
MagCellect Human CD24–CD44+ 乳腺癌干細胞分離試劑盒旨在分離數(shù)量較少的人乳腺癌細胞,這些細胞有著獨特的能力,可在小鼠中形成新的腫瘤。此試劑盒采用兩步法操作,將陰性選擇和陽性選擇技術(shù)結(jié)合起來。首先通過陰性選擇富集CD24low/– 細胞,而不想要的CD24+ 細胞則被標(biāo)記,并通過磁性去除。隨后利用生物素化的人CD44抗體、鏈霉親和素結(jié)合的磁珠和MagCellect 磁鐵(貨號 MAG997,或類似產(chǎn)品),從CD24low/– 細胞群體中分離出CD44+ 細胞。利用試劑盒提供的熒光染料結(jié)合的人CD24和CD44檢測抗體對回收的細胞染色,可評估富集效率。
分析原理
(圖片來自R&D Systems)
癌細胞分選
除了MagCellect Human CD24–CD44+ 乳腺癌干細胞分離試劑盒,R&D Systems還提供了一些PlusCellect細胞分選試劑盒,它們可通過陽性選擇分離出表達特定癌癥相關(guān)標(biāo)志物的細胞。
利用PlusCellect試劑盒,目的細胞被標(biāo)上分析物特異的生物素化的選擇抗體,隨后與鏈霉親和素結(jié)合的磁珠結(jié)合(MagCellect Streptavidin Ferrofluid)。標(biāo)記的細胞可利用適當(dāng)?shù)拇判韵到y(tǒng)(MagCellect 磁鐵)來分離,而未標(biāo)記的細胞則可通過抽吸培養(yǎng)基而去除。標(biāo)記的細胞重懸在PlusCellect緩沖液中,通過每個試劑盒提供的熒光染料結(jié)合的分析物特異的檢測抗體可評估富集效率。
目前PlusCellect系列產(chǎn)品包括CD44+、CXCR4+、EGF R/ErbB1+、EpCAM+、ErbB2/HER2+、HGF R/c-Met+、Nectin-4+ 細胞分離試劑盒。
分析原理
(圖片來自R&D Systems)