MPM-2PKIT多光子基本套件是Thorlabs公司為想要自己搭建多光子成像系統(tǒng)的研究人員提供的解決方案，在量身定制的同時(shí)又不犧牲成像的性能。該套件包含一個(gè)模塊化多光子成像系統(tǒng)所必須的核心部件，為特定應(yīng)用而配置。此外，該系統(tǒng)無需傳統(tǒng)顯微鏡，即可以對(duì)大樣品，如整個(gè)活體生物等進(jìn)行成像，并且該設(shè)計(jì)減小了其在工作臺(tái)上占據(jù)的體積。
MPM-2PKIT 基本套件是由MPM200-2多光子成像系統(tǒng)衍生而來的，但該套件以組件形式存在。該套件包含一個(gè)掃描頭、一個(gè)近紅外（NIR）掃描和套筒透鏡配件、一個(gè)初級(jí)分色鏡模塊、一個(gè)作為二次分色和發(fā)射濾光的濾光片模塊、兩個(gè)高靈敏度GaAsP光電倍增管和圖像采集電路及軟件。多光子顯微鏡基本套件的外觀如圖1所示。
圖1 多光子顯微鏡基本套件
本系統(tǒng)的光路圖如圖2所示
圖2 多光子顯微鏡套件光路圖
多光子顯微鏡系統(tǒng)在生物學(xué)領(lǐng)域的一個(gè)成功實(shí)例是活體細(xì)胞成像。多光子顯微技術(shù)非常適合于樣品需要長時(shí)間成像的活體細(xì)胞研究。其高速掃描特性減少了在活體細(xì)胞成像過程中的光漂白效應(yīng)，這對(duì)于細(xì)胞成像是很有利的。Thorlabs公司的多光子系統(tǒng)通過一個(gè)掃描振鏡對(duì)實(shí)現(xiàn)高速掃描。該系統(tǒng)還采用近紅外雙光子激發(fā)效應(yīng)，促進(jìn)了樣品的深度滲透，將光漂白效應(yīng)最小化，與單光子激發(fā)技術(shù)相比降低了光學(xué)毒性。多光子顯微技術(shù)已經(jīng)成功用于追蹤GFP標(biāo)記的細(xì)胞和細(xì)胞結(jié)構(gòu)，如C.Elegens線蟲中的G蛋白受體，見圖3。
圖3 C.Elegens線蟲中的G蛋白受體成像
實(shí)時(shí)活體腎血流動(dòng)的灌注檢測(cè)也是一個(gè)例子，兩個(gè)通道使用一個(gè)Olympus 20X 1.0 NA物鏡以30幀/秒（512*512分辨率）同時(shí)進(jìn)行圖像采集。血液與葡萄糖（血漿，綠色）和1微米熒光微球的混合物一起灌注。在血管中我們追蹤兩個(gè)獨(dú)立的微球（A和B）。后續(xù)幀之間的高瞬時(shí)分辨率保證了各微球更精確的速度測(cè)量。在綠色的血漿之中我們還可以觀察到一些暗色物體，這些暗色物體是紅細(xì)胞，這樣就為血液流動(dòng)分析提供了額外的依據(jù)。
圖4 實(shí)時(shí)活體腎血流動(dòng)的灌注檢測(cè)
