|
簡(jiǎn)介 |
|
|
|
|
| |||||||||||
|
Minilys與Precellys 24均是集研磨、裂解、均質(zhì)為一體的多功能均質(zhì)器。專門用來(lái)提取各種各樣生物樣本的DNA、RNA或蛋白質(zhì)。其工作原理是通過(guò)三維高速振動(dòng)和輔助研磨珠（玻璃珠、陶瓷珠、鋼珠等）的敲打，達(dá)到對(duì)樣品進(jìn)行研磨、裂解、均質(zhì)的目的。Minilys小巧、簡(jiǎn)潔，屬于個(gè)人型均質(zhì)器，而Precellys 24能應(yīng)付較高的通量。兩種型號(hào)都能夠在0.5mL, 2mL或 7mL 管子中對(duì)樣本進(jìn)行均質(zhì)、研磨和裂解。通過(guò)這種機(jī)械化裂解得到的樣品能夠進(jìn)一步使用多種分析方法進(jìn)行分析，比如DNA-RNA電泳、實(shí)時(shí)定量PCR、Western-blot分析、氣相色譜法-質(zhì)譜法聯(lián)用分析、液相色譜法－質(zhì)譜法聯(lián)用分析等等。本文此次介紹Minilys與Precellys 24研磨植物葉子提取DNA并進(jìn)行定量分析，對(duì)比兩種型號(hào)的均質(zhì)效果。 | ||||||||||||||||
|
|
|
|
|
|
| |||||||||||
|
材料 |
|
|
|
|
| |||||||||||
|
· |
Minilys均質(zhì)器 |
|
| |||||||||||||
|
· |
瓷珠(Precellys kit: 0 | |||||||||||||||
|
· |
DNA提取液（peqGOLD Plant DNA mini Kit） | |||||||||||||||
|
· |
樣本: 100 mg植物葉子 | |||||||||||||||
|
· |
緩沖液: 100 μl TE buffer | |||||||||||||||
|
|
| |||||||||||||||
|
|
|
|
|
Minilys |
Precellys 24 | |||||||||||
|
方法 |
|
|
|
|
| |||||||||||
|
Minilys: 5000 rpm, 30 sec 數(shù)據(jù)分析: 使用DNA提取液直接從裂解樣本中提取總基因組DNA，然后使用分光光度計(jì)檢測(cè)DNA的含量。 | ||||||||||||||||
|
|
|
|
| |||||||||||||
|
結(jié)果 |
|
|
|
|
| |||||||||||
|
使用Minilys提取植物葉子的總基因組DNA，使用分光光度計(jì)(BMG Labtech)測(cè)定DNA的濃度和吸光度比值，如Figure 1所示。使用Minilys得到的總基因組DNA量與使用Precellys得到的量相當(dāng)。 | ||||||||||||||||
|
|
|
| ||||||||||||||
|
| ||||||||||||||||
|
| ||||||||||||||||
|
| ||||||||||||||||
|
| ||||||||||||||||
|
| ||||||||||||||||
|
| ||||||||||||||||
|
Figure 1: mean concentration of total genomic DNA from 3 extracted samples of leaves with Minilys (run 1 and 2) in comparison with Precellys 24. The corresponding mean absorption ratios (260/280; 260/230) are also plotted. |
|
Figure 2: illustration of absorption analysis using a BMG microplate reader. | ||||||||||||||
|
|
|
| ||||||||||||||
|
無(wú)論是Minilys還是Precellys 24均質(zhì)器都能得到高質(zhì)量且相當(dāng)質(zhì)量的總基因組DNA. 在低通量的實(shí)驗(yàn)需求中Minilys具備高效、省時(shí)、易用等多個(gè)方面的優(yōu)勢(shì)。相比傳統(tǒng)的研缽研磨破碎方法，Minilys能使均質(zhì)化過(guò)程中可能會(huì)遇到的交叉污染問(wèn)題得到克服。 | ||||||||||||||||
