太原市疾病預(yù)防控制中心的PCR核酸檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室設(shè)置在中心4樓。在進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室前,工作人員需先在更衣室穿上防護(hù)衣,戴上口罩、帽子和手套。經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的防護(hù)消毒流程后,記者跟隨工作人員進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室的“玻璃屋”。實(shí)驗(yàn)室分為四個(gè)獨(dú)立的區(qū)域,分別是:試劑準(zhǔn)備區(qū)、標(biāo)本制作區(qū)、擴(kuò)增區(qū)和產(chǎn)物分析區(qū)。在試劑準(zhǔn)備區(qū),記者看到,工作人員根據(jù)不同試劑的屬性,將檢測(cè)試劑盒分別冷藏在2-8攝氏度以及零下20攝氏度的專用冰柜中。通常情況下,檢測(cè)試劑在這個(gè)區(qū)域內(nèi)“整裝待發(fā)”,并“組裝完成”。在這個(gè)區(qū)域配制成功后的試劑,將被通過(guò)特殊傳送窗口,進(jìn)入到隔壁的“標(biāo)本制作區(qū)”。
標(biāo)本制作區(qū)是整個(gè)實(shí)驗(yàn)室的核心部位,通常情況下,工作人員要在這里將流感病毒的核酸提取出來(lái)。核酸是病毒基因,核酸提取在H7N9禽流感病毒的檢測(cè)中是最關(guān)鍵一步。工作人員高麗介紹:在平日的檢測(cè)過(guò)程中,檢測(cè)員會(huì)在離心瓶中放入檢測(cè)試劑,經(jīng)過(guò)震蕩、離心等一系列復(fù)雜的程序,病毒的核酸便被分離出來(lái)。最后,樣本被加入到外形像個(gè)小型洗衣機(jī)的“熒光定量PCR儀器”中。在擴(kuò)增區(qū),隨著儀器的運(yùn)轉(zhuǎn),病毒基因被擴(kuò)增到了幾百萬(wàn)個(gè)不等,經(jīng)過(guò)3-5個(gè)小時(shí)后,檢測(cè)結(jié)果將會(huì)顯示在電腦屏幕上,檢測(cè)人員就可以根據(jù)曲線圖判斷是否為H7N9病毒。
值得一提的是,為了保證環(huán)境清潔,實(shí)驗(yàn)室使用單向通道,“只能前進(jìn),不能倒退”。當(dāng)記者提出想返回先前的區(qū)域時(shí),工作人員表示,必須先從出口門(mén)出去,再?gòu)娜肟谥匦逻M(jìn)來(lái)。記者看到,每個(gè)實(shí)驗(yàn)區(qū)域都設(shè)置了單獨(dú)的洗手臺(tái)和清潔池。工作人員每進(jìn)入下一級(jí)區(qū)域,將被要求換上不同顏色的防護(hù)服。根據(jù)防護(hù)級(jí)別不同,防護(hù)衣分為粉色、綠色和藍(lán)色。“檢測(cè)H7N9病毒,從試劑準(zhǔn)備到出結(jié)果,一般需要8個(gè)小時(shí)左右?!备啕悈⑴c了前3例的疑似病例排查。她說(shuō),為減少實(shí)驗(yàn)過(guò)程中的污染,保證結(jié)果精準(zhǔn),整個(gè)檢測(cè)過(guò)程中,實(shí)驗(yàn)人員被要求全程呆在實(shí)驗(yàn)室。H7N9禽流感病毒檢測(cè)需要重復(fù)檢測(cè)兩次,如果結(jié)果相同,再送到省疾控中心實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)一次,如果結(jié)果呈陽(yáng)性,將被送到中國(guó)疾控中心實(shí)驗(yàn)室復(fù)核。
負(fù)壓隔離病房:帶菌空氣特殊處理后排放
作為我省首批唯一一所人感染H7N9禽流感的省市兩級(jí)定點(diǎn)救治醫(yī)院,太原市第四人民醫(yī)院的重癥醫(yī)學(xué)科已按照相關(guān)要求:備好32張救治病床,并做好了一切救治準(zhǔn)備。4月15日,本報(bào)記者被特許進(jìn)入該院的負(fù)壓隔離病房進(jìn)行探訪。
重癥醫(yī)學(xué)科被分為清潔區(qū)、潛在污染區(qū)、緩沖間和隔離病房等區(qū)域。在進(jìn)入隔離病房之前,記者被要求不能隨意進(jìn)出,因?yàn)殡S著開(kāi)關(guān)門(mén)次數(shù)的增多,病房?jī)?nèi)的壓力會(huì)即時(shí)發(fā)生改變,進(jìn)而影響到室內(nèi)空氣質(zhì)量。在負(fù)壓病房外,醫(yī)院專門(mén)設(shè)立了緩沖間,“醫(yī)務(wù)人員在緩沖間要換好N95口罩、穿戴好鞋帽、護(hù)目鏡、白色連體防護(hù)衣后才進(jìn)入?!敝匕Y醫(yī)學(xué)科護(hù)士長(zhǎng)張霞說(shuō)。
負(fù)壓病房是世衛(wèi)組織在規(guī)定搶救SARS病人時(shí)特別強(qiáng)調(diào)的一個(gè)重要條件,只有設(shè)置負(fù)壓病房的醫(yī)院,才可以救治有嚴(yán)重呼吸系統(tǒng)傳染病的病人。
這里一間負(fù)壓隔離病房面積約為18平方米。按照救治重癥病人的標(biāo)準(zhǔn),醫(yī)院已在房間內(nèi)配備了有創(chuàng)呼吸機(jī)、無(wú)創(chuàng)呼吸機(jī)、輸液泵、注射泵、吸氧裝置等裝置,“確保重癥病人一來(lái),醫(yī)護(hù)人員馬上投入搶救。”醫(yī)院相關(guān)負(fù)責(zé)人介紹:“負(fù)壓病房”意味著病房的壓力最低。在病房開(kāi)門(mén)的瞬間,新鮮空氣會(huì)被“壓”進(jìn)病房,而病房?jī)?nèi)的空氣卻不會(huì)“溜出去”。這既保證了給病人輸送新鮮的空氣,又能防止病房?jī)?nèi)的污染氣體向外倒流。記者發(fā)現(xiàn),隔離病房的送風(fēng)口在病床的上方,出風(fēng)口在病床一側(cè)的墻壁下方。張霞介紹,之所以這樣設(shè)計(jì),是為了讓病人躺在病床上時(shí),“頭部送來(lái)新風(fēng),而呼出的氣體通過(guò)負(fù)壓,從側(cè)面的管道里抽送出去,經(jīng)過(guò)特殊處理后排放。”
除了大量的搶救設(shè)備以及負(fù)壓設(shè)計(jì)外,記者在隔離病房?jī)?nèi)發(fā)現(xiàn)了一個(gè)1平方米大小的傳遞窗。張霞介紹:病人救治期間,食物、藥品等物品會(huì)通過(guò)傳遞窗消毒后送入病床前,這樣可以避免醫(yī)護(hù)人員由于傳送物品而頻繁進(jìn)出病房所帶來(lái)的污染。病房?jī)蓚?cè)的走廊是雙通道設(shè)計(jì):工作人員和醫(yī)務(wù)人員一個(gè)通道,病人走另外一個(gè)通道。病房床頭的方桌上,擺放著手部消毒液。張霞說(shuō),在對(duì)病人進(jìn)行救治的過(guò)程中,醫(yī)護(hù)人員被要求隨時(shí)用消毒液對(duì)手部進(jìn)行消毒。
隔離病房?jī)?nèi)設(shè)置有單獨(dú)的衛(wèi)生間。據(jù)介紹,衛(wèi)生間的局部壓力要比病房低一些,“因?yàn)槟抢镉胁∪说姆置谖锖团判刮?,壓力低的目的在于:避免污濁的空氣和病菌外流。”記者在衛(wèi)生間看到,醫(yī)院專為病人配備了單獨(dú)的洗漱池和便池,方便病人使用。
檢測(cè)相關(guān)程序 讓病毒現(xiàn)出原形
步驟一:提取樣本
一旦發(fā)現(xiàn)可疑病例,遍布全省各市的哨點(diǎn)醫(yī)院將提取患者的鼻咽拭子或是呼吸道樣本,送往省內(nèi)15家具有試劑及確診能力的網(wǎng)絡(luò)實(shí)驗(yàn)室。
步驟二:標(biāo)本處理
送達(dá)的標(biāo)本將首先拿到生物安全柜內(nèi)進(jìn)行處理,防止標(biāo)本被外環(huán)境污染和實(shí)驗(yàn)人員被感染。
工作人員將粘有咽部上皮細(xì)胞的棉簽充分?jǐn)D壓,這樣細(xì)胞才能釋放出來(lái)融入液體內(nèi)。
步驟三:提取核酸
融入細(xì)胞的的液體將由工作人員送到一臺(tái)名為“核酸提取工作站”的儀器內(nèi)提取病毒的核酸(DNA)。
儀器采取磁珠法提取,經(jīng)過(guò)裂解處理,磁珠吸附核酸,再將磁珠上的核酸洗出,完成核酸從細(xì)胞中提取。
步驟四:確定病毒
核酸提取后,對(duì)病毒進(jìn)行PCR檢測(cè)。此前,將進(jìn)行PCR體系配置:向樣本中添加反應(yīng)劑,讓病毒“現(xiàn)身”。針對(duì)H7N9病毒檢測(cè),國(guó)家下發(fā)的有9種反應(yīng)劑。如有病毒成分,起反應(yīng)時(shí)將被儀器感知。
體系配置完畢后,與已提取出的核酸融合,通過(guò)熒光定量機(jī)檢測(cè),確定是否為流感,確定是哪類流感。