移液器雖小,但是作為實(shí)驗(yàn)室常規(guī)儀器之一,對(duì)我們的實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和精確性還是起著不小的作用,因此為了提高我們的實(shí)驗(yàn)效果,萊貝在本文要說(shuō)說(shuō)移液器的消毒滅菌處理。在本文中,萊貝將以IKA移液器為例進(jìn)行介紹。
一、首先,我們來(lái)說(shuō)說(shuō)常規(guī)的高溫高壓滅菌處理
1、 如果是不可整支消毒的移液器,先用滅菌袋、錫紙或者牛皮紙等材料包裝需要滅菌的部件,121℃,1bar大氣壓,20分鐘;滅菌完畢后,在室溫下完全晾干后,給活塞上油,再進(jìn)行組裝。
2、 如果是可整支消毒的移液器(譬如德國(guó)IKA移液器),則可以將整支移液器放置于121℃,1bar大氣壓,進(jìn)行20分鐘的整支高溫高壓消毒。
3、 如果有些移液器不能進(jìn)行高溫高壓消毒,但是又需要用于某些特殊的操作,比如RNA提取等,如果擔(dān)心移液器被污染影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果,那么就用75%的乙醇清洗移液器的頭部。
如果是用于提取RNA要用無(wú)RNase污染的75%乙醇。
注意:半支消毒的移液器不可以進(jìn)行整支消毒,否則會(huì)出現(xiàn)讀數(shù)的數(shù)字部位變色,讀數(shù)不準(zhǔn)等明顯現(xiàn)象。
其次是UV紫外線照射滅菌
IKA移液器是采用抗紫外線的高質(zhì)量材料制作的,整支移液器可暴露在紫外線照射下進(jìn)行表面消毒。
二、移液器上DNA污染的去除
我們先來(lái)說(shuō)說(shuō)處理方法:
1、10X儲(chǔ)藏液稀釋成1倍緩沖液,將IKA® Alpha 或 Precision兩個(gè)系列移液器下半部分被拆卸下來(lái)的內(nèi)外套筒,在95℃下浸泡30分鐘。
2、用蒸餾水將套筒沖洗干凈。
3、在60℃下進(jìn)行烘干處理,或者完全晾干。
4、在活塞表面涂上硅油并組裝部件。
清洗液,10X儲(chǔ)藏液的配制:
30.6g NaCl
39.2g Glycine
523ml H2O
加1 N HC1 至 1000ml