一、移液器消毒
移液器消毒有兩種方法:
1.化學(xué)消毒。簡單說來,就是用酒精等擦拭移液器的外表面,然后晾干即可。這對于所有移液器品牌而言應(yīng)該是都可以做到的;如果說有某種移液器無法用化學(xué)消毒這種方法來進(jìn)行消毒的話,只能證明其外殼的材質(zhì)非常之差。
2.紫外線消毒。就是用紫外線照射移液器的表面,通過破壞細(xì)胞的DNA結(jié)構(gòu)來達(dá)到消毒的目的。紫外線消毒的時間取決于輻射強度和細(xì)菌對紫外線的抵抗力強弱。大多數(shù)品牌的移液器是可以用紫外線消毒的,但仍需要事先與供應(yīng)商進(jìn)行確認(rèn),并非所有的移液器都能進(jìn)行紫外線消毒。
二、移液器滅菌
首先,我們來說說常規(guī)的高溫高壓滅菌處理
1、 如果是不可整支消毒的移液器,先用滅菌袋、錫紙或者牛皮紙等材料包裝需要滅菌的部件,121℃,1bar大氣壓,20分鐘;滅菌完畢后,在室溫下完全晾干后,給活塞上油,再進(jìn)行組裝。
2、 如果是可整支消毒的移液器(譬如德國IKA移液器),則可以將整支移液器放置于121℃,1bar大氣壓,進(jìn)行20分鐘的整支高溫高壓消毒。
3、 如果有些移液器不能進(jìn)行高溫高壓消毒,但是又需要用于某些特殊的操作,比如RNA提取等,如果擔(dān)心移液器被污染影響實驗結(jié)果,那么就用75%的乙醇清洗移液器的頭部。
如果是用于提取RNA要用無RNase污染的75%乙醇。
注意:半支消毒的移液器不可以進(jìn)行整支消毒,否則會出現(xiàn)讀數(shù)的數(shù)字部位變色,讀數(shù)不準(zhǔn)等明顯現(xiàn)象。
其次是UV紫外線照射滅菌
IKA移液器是采用抗紫外線的高質(zhì)量材料制作的,整支移液器可暴露在紫外線照射下進(jìn)行表面消毒。
三、移液器上DNA污染的去除
我們先來說說處理方法:
1、10X儲藏液稀釋成1倍緩沖液,將IKA® Alpha 或 Precision兩個系列移液器下半部分被拆卸下來的內(nèi)外套筒,在95℃下浸泡30分鐘。
2、用蒸餾水將套筒沖洗干凈。
3、在60℃下進(jìn)行烘干處理,或者完全晾干。
4、在活塞表面涂上硅油并組裝部件。
清洗液,10X儲藏液的配制:
30.6g NaCl
39.2g Glycine
523ml H2O
加1 N HC1 至 1000ml