沃特世公司(簡稱沃特世）近日推出了新型的 Waters® ACQUITY UPLC® M-Class系統(tǒng) ，這是業(yè)內(nèi)首臺涵蓋納升級至微升級的UltraPerformance LC® (UPLC®)超高效液相色譜系統(tǒng)，系統(tǒng)耐壓高達15,000 psi。將此系統(tǒng)與沃特世質(zhì)譜儀聯(lián)用，能夠?qū)?fù)雜樣品體系中含量極低的分子進行鑒定和定量，提供前所未有的高靈敏度。ACQUITY UPLC M-Class系統(tǒng)可用于蛋白質(zhì)組學、代謝分析、代謝物鑒定和藥代動力學研究等各個領(lǐng)域。同時，全新設(shè)計的可耐受15,000 psi壓力的亞2 μm色譜柱，提供更快的分離速度、更高的峰容量和靈敏度。
ACQUITY UPLC M-Class系統(tǒng)在 WCBP 2014研討會 上首次亮相，這是一個以生物技術(shù)藥物分析方法為主題的學術(shù)會議。新系統(tǒng)將于今年第一季度開始發(fā)貨。
ACQUITY UPLC M-Class系統(tǒng)
“進行蛋白質(zhì)組學研究和生物技術(shù)藥物研發(fā)的科學家們向我們反饋，說他們經(jīng)常會遇到非常有挑戰(zhàn)的研究課題：樣品組成非常復(fù)雜，性質(zhì)相近的干擾物含量遠遠高于目標蛋白分子，要對這些極微量的關(guān)鍵蛋白質(zhì)分子進行鑒定和定量;也需要獲得高覆蓋率的蛋白質(zhì)鑒定結(jié)果。如果沒有合適的分析工具，這將會是一個非常棘手的問題?，F(xiàn)在，有了ACQUITY UPLC M-Class系統(tǒng)，科學家們就能夠探索未知領(lǐng)域，實現(xiàn)研究目標。”沃特世公司總裁Art Caputo說，“作為質(zhì)譜儀的LC接入口，這套系統(tǒng)能讓更多的科學家輕松采用微升級色譜解決最為復(fù)雜的分析難題?！?/P>
納升級至微升級LC是指介于200 nL/min至100 μL/min的流速范圍，使用小于1.0 mm內(nèi)徑色譜柱的LC系統(tǒng)，其優(yōu)點包括節(jié)省樣品和溶劑、更高的分析靈敏度以及更好的電噴霧離子化質(zhì)譜(ESI MS)分析靈敏度。
ACQUITY UPLC M-Class系統(tǒng)的主要創(chuàng)新在于更低的系統(tǒng)體積和全新設(shè)計的流路，保證在色譜分離過程中最大程度地降低擴散和由于吸附而造成的樣品損失。系統(tǒng)內(nèi)部流路全部使用惰性材料，可保證樣品穩(wěn)定不被改變，并最大程度提高目標生物分子的回收率。為保持峰容量，該系統(tǒng)配備了專為微升級分離而優(yōu)化設(shè)計的新型微升級ESI質(zhì)譜噴針，以及低擴散的光學檢測流通池，以保持光學檢測的高分離度和靈敏度。憑借更高的系統(tǒng)耐壓，您可以使用更長的亞2 μm顆粒色譜柱(長達250mm)，達到更快的分析速度和更高的分離度。
隨著ACQUITY UPLC M-Class系統(tǒng)的推出，沃特世還同時推出了五款內(nèi)徑從75 μm至1.0 mm的新型色譜柱，分別為：HSS T3(1.8 μm，孔徑100
)、BEH C18(1.7 μm，孔徑130和300)、BEH C4(1.7 μm，孔徑300)、CSH C18(1.7 μm，孔徑130)和Symmetry® C18(5 μm，孔徑
100)。并且，沃特世還推出了全新的亞2 μm顆粒300 μm內(nèi)徑不銹鋼色譜柱系列。
利用HDX技術(shù)監(jiān)測蛋白質(zhì)高級結(jié)構(gòu)
氫氘交換質(zhì)譜(HDX-MS) 用于研究蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)動力學和構(gòu)型變化，可更好地確定它們的高級結(jié)構(gòu)。氘是氫的一種重同位素，因此可以通過質(zhì)譜對氘含量進行測量或“稱重”。
科學家們使用HDX-MS研究獲得的信息對不同“狀態(tài)”的蛋白質(zhì)高級結(jié)構(gòu)進行對比，如對比與候選藥物結(jié)合前和與結(jié)合后的構(gòu)型變化，定位藥物結(jié)合部位和結(jié)合的強弱。通過計算和比較氘交換水平的差別來獲得蛋白質(zhì)構(gòu)型變化的信息。HDX-MS能夠在溶液中監(jiān)測蛋白結(jié)合域相互作用情況、蛋白質(zhì)結(jié)合動力學、配體結(jié)合以及蛋白質(zhì)折疊等相關(guān)研究。
HDX-MS研究需要對蛋白質(zhì)構(gòu)型的微小變化進行檢測，高效率的色譜分離對達到高品質(zhì)的數(shù)據(jù)結(jié)果至關(guān)重要。ACQUITY UPLC M-Class系統(tǒng)更高的耐壓確保了能夠在0℃對酶切肽段快速進行LC分離和質(zhì)譜檢測。全自動HDX-MS系統(tǒng)整合了HDX-MS的所有步驟，包括全自動的氫氘交換樣品制備過程、蛋白質(zhì)序列確定、氘交換曲線以及沃特世獨有的DyanmXTM HDX數(shù)據(jù)分析軟件。
同時發(fā)布的還有沃特世專門開發(fā)的用于用于蛋白質(zhì)“在線酶切”的UPLC色譜柱，即Waters EnzymateTM BEH在線Pepsin酶切柱，將HDX-MS效果提升到一個新高度。ACQUITY UPLC M-Class系統(tǒng)與Waters SYNAPT® G2-Si或Xevo® G2-S QTof質(zhì)譜儀聯(lián)用，提供高質(zhì)量的圖譜和數(shù)據(jù)，得到HDX-MS分析所需要的微小質(zhì)量變化。將所有這些創(chuàng)新技術(shù)組合在一起，沃特世提供了完整的且獨一無二的HDX-MS分析平臺。
利用二維分離擴展分析動態(tài)范圍
對于復(fù)雜樣品，特別是當樣品中的目標組分如蛋白質(zhì)、肽或小分子的動態(tài)范圍很寬時，二維LC是非常有用的策略。利用此技術(shù)能夠增加色譜峰容量，具體的操作是先通過第一維分離對蛋白或肽進行分組，所得到的每一個餾分經(jīng)過富集，再通過具有不同選擇性的第二維色譜柱進行分離。
ACQUITY UPLC M-Class系統(tǒng)采用直觀易用的向?qū)Р藛芜M行方法設(shè)置、標準化的色譜柱以及具有高重現(xiàn)性的色譜儀器有效簡化了2D-LC分離。智能化閥操作增加了樣品通量，同時最大程度地提高數(shù)據(jù)質(zhì)量。
