一、ELISA實驗中血清的采集、處理和保存;
1、 真空采血針采集2ml新鮮血液,加入無菌試管中;
2、 采血后室溫靜置1小時;
3、 將采集血液用離心機4℃,2500rpm離心10min,,將離心好的勻漿留上清,棄下面沉淀。
4、 取上清。 分裝凍存?zhèn)溆茫?/SPAN>
2-8℃下,可放置保存24-48小時;
-20℃下,可放置保存1個月;
-70℃下,可放置保存6個月;
5、 根據(jù)你的實驗需要,取適量上清夜進行各種ELISA測定。
大部分ELISA檢測均以血清為標本。血清標本可按常規(guī)方法采集,應(yīng)注意避免溶血,紅細胞溶解時會釋放出具有過氧化物酶活性的物質(zhì),以HRP為標記的 ELISA測定中,溶血標本可能會增加非特異性顯色。此外還應(yīng)避免細菌污染,因為菌體中可能含有含有內(nèi)源性HRP,也會產(chǎn)生假陽性反應(yīng)。血清標本宜在新鮮 時檢測。如在冰箱中保存過久,其中的可發(fā)生聚合,在間接法ELISA中可使本底加深。
二、ELISA實驗中血漿的采集、處理和保存;
1、 真空采血針采集2ml新鮮血液,加入無菌試管中;
2、 按1:9加入抗凝劑(EDTA、草酸鈉、肝素、枸櫞酸鈉),30分鐘內(nèi)于冰上分離血漿以減少血小板的污染;(也可以直接用抗凝管采集);
3、 將采集血液用離心機4℃,2500rpm離心5min,,將離心好的勻漿留上清,棄下面沉淀。
4、 取上清。 分裝凍存?zhèn)溆茫?/SPAN>
2-8℃下,可放置保存24-48小時;
-20℃下,可放置保存1個月;
-70℃下,可放置保存6個月;
5、 根據(jù)你的實驗需要,取適量上清夜進行各種ELISA測定。
注意事項:制備血漿標本需借助于抗凝劑EDTA,抗凝不完全的標本因纖維蛋白原干擾而造成假陽性。
三、ELISA 實驗中尿液的采集、處理和保存;
1、 采集尿液樣本500ul,加入無菌試管中;
2、 將采集血液用離心機4℃,2500rpm離心10min,,將離心好的樣本留上清,棄下面沉淀。
3、 取上清。 分裝凍存?zhèn)溆茫?/SPAN>
2-8℃下,可放置保存24-48小時;
-20℃下,可放置保存1個月;
-70℃下,可放置保存6個月;
4、 根據(jù)你的實驗需要,取適量上清夜進行各種ELISA測定。
四、ELISA 實驗中腦脊液的采集、處理和保存;
1、采集腦脊液樣本,加入無菌試管中;
2、將采集血液用離心機4℃,2500rpm離心10min,,將離心好的樣本留上清,棄下面沉淀。
3、取上清。 分裝凍存?zhèn)溆茫?/SPAN>
2-8℃下,可放置保存24-48小時;
-20℃下,可放置保存1個月;
-70℃下,可放置保存6個月;
4、根據(jù)你的實驗需要,取適量上清夜進行各種ELISA測定。
五、ELISA 實驗中細胞上清液的采集、處理和保存;
1、采集細胞培養(yǎng)上清液500ul,加入無菌試管中;
2、將采集血液用離心機4℃,2500rpm離心10min,,將離心好的勻漿留上清