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表面增強(qiáng)拉曼(SERS)距離臨床應(yīng)用還有多遠(yuǎn)?

   2024-12-23 儀器信息網(wǎng)537
     目前,對(duì)很多應(yīng)用來說,拉曼光譜已發(fā)展成為一種強(qiáng)大的表征技術(shù)。但如果要使其在臨床分析中更有效,還需要做更多的工作。

  隨著激光的發(fā)現(xiàn),以及后續(xù)激光器和探測(cè)器技術(shù)的進(jìn)步,以前發(fā)展緩慢的拉曼光譜進(jìn)入了一個(gè)高速的發(fā)展階段。目前,已經(jīng)證明了拉曼光譜在生物大分子分析方面的應(yīng)用價(jià)值,包括蛋白質(zhì)、DNA、活細(xì)胞、組織和微生物的檢測(cè)和診斷。

  然而,拉曼散射是一個(gè)很弱的過程,只有一百萬分之一的光子才會(huì)發(fā)生彈性散射現(xiàn)象。另外一個(gè)問題,自體熒光也阻礙了拉曼技術(shù)在生物學(xué)中的應(yīng)用。幸運(yùn)的是,70年代早期,一個(gè)新穎的現(xiàn)象被發(fā)現(xiàn),分子接觸(或非常接近)貴金屬表面,如銀和金,拉曼散射信號(hào)就會(huì)增加了1011倍,由此表面增強(qiáng)拉曼散射(SERS)也就發(fā)展起來了。除了散射增強(qiáng)之外,SERS還可以有效淬滅自體熒光。

  盡管現(xiàn)在SERS在生物結(jié)構(gòu)的分析方面已經(jīng)有很多研究,但在我看來,在科學(xué)研究和臨床應(yīng)用之間還有一定的距離。此外,如果沒弄明白臨床應(yīng)用的需求和流程,這種技術(shù)也不可能轉(zhuǎn)化為真正的應(yīng)用。

  例如,對(duì)于從一個(gè)生物SERS實(shí)驗(yàn)中收集的數(shù)據(jù),還有幾個(gè)問題需要仔細(xì)考慮,以得到清晰的解釋。首先,對(duì)于感興趣的樣品的SERS襯底類型需要仔細(xì)的選擇。它應(yīng)該是一個(gè)納米結(jié)構(gòu)的表面或膠體納米顆粒,如金納米顆粒(AuNP)或銀納米顆粒(AgNP)。如果樣品是活細(xì)胞,AuNPs或AgNPs是很好的選擇。如果樣品是微生物,表面或膠體納米顆粒襯底是最好的。

  選擇最合適的襯底之后,再現(xiàn)性和適用性的測(cè)試也是很重要的。評(píng)估獲得的光譜信息時(shí)應(yīng)該考慮官能團(tuán)和貴金屬表面的選擇性相互作用,如SH、NH2,因?yàn)檫@些交互作用定義了環(huán)境。

  十年來,我們對(duì)這項(xiàng)技術(shù)是否可以應(yīng)用到臨床決策中進(jìn)行了評(píng)估。我們利用實(shí)驗(yàn)室中發(fā)展起來的樣品制備方法和檢測(cè)技術(shù)分析了活細(xì)胞和死細(xì)胞、組織和微生物樣本。我們認(rèn)為還有很多工作需要去做來探索該技術(shù)的潛力,因?yàn)樯飿悠凡粌H非常復(fù)雜,而且不同樣本之間也存在產(chǎn)異性。

  臨床中,快速識(shí)別傳染性微生物在疾病干預(yù)方面至關(guān)重要。雖然有許多研究證明了利用SERS可以快速識(shí)別微生物,但是從臨床樣本中識(shí)別它們的能力尚不清楚。

  生物樣品的復(fù)雜性,如血液和尿液,是減少了解樣品狀態(tài)所需時(shí)間的一個(gè)主要的障礙。例如,尿液樣本中可能有許多化學(xué)物質(zhì),包括尿素和肌酸酐、溶解的離子、白色和紅色的血細(xì)胞、蛋白質(zhì)連同傳染性病原體。如果沒有完全的清洗或分離,這些成分可能會(huì)干擾或阻礙SERS的檢測(cè),同時(shí)也勢(shì)必增加分析時(shí)間。當(dāng)然,其中還有幾個(gè)問題需要解決以確定尿樣的感染狀況。第一個(gè)問題很簡單:樣品是否感染? 1毫升尿樣中細(xì)菌的數(shù)量決定了答案,尿液樣本包含細(xì)菌數(shù)大于105cfu /ml被認(rèn)為感染。然后,我們必須問哪種病原體存在?然后再問是否有一個(gè)SERS可以識(shí)別的標(biāo)識(shí)物來顯示尿液是否感染?這項(xiàng)技術(shù)是否可以用于細(xì)菌樣本的定量分析?這項(xiàng)技術(shù)能識(shí)別病原體嗎?

  我們已經(jīng)知道, SERS可以識(shí)別細(xì)菌,但從復(fù)雜樣品中識(shí)別細(xì)菌仍需進(jìn)一步的努力以加快這一進(jìn)程。在我看來,對(duì)于以上的部分問題得到積極的答案并不是很遠(yuǎn)的事情,而且也將縮短SERS進(jìn)入提高臨床決策這個(gè)位置所需的時(shí)間。

  作者:Mustafa Culha

  Mustafa Culha的實(shí)驗(yàn)室在葉迪特佩大學(xué)遺傳和生物工程系,該實(shí)驗(yàn)室持續(xù)進(jìn)行光譜技術(shù)的實(shí)用研究,如表面增強(qiáng)拉曼散射(SERS)揭示活細(xì)胞、死細(xì)胞相互作用,發(fā)展用于醫(yī)學(xué)和生物醫(yī)學(xué)的新穎的檢測(cè)和診斷工具。他在同行評(píng)議的國際期刊和幾本書的章節(jié)中撰寫了70多篇論文,擁有若干生物分析化學(xué)和納米技術(shù)方面的專利。他是Nanotechnology雜志的SERS研究和Nanoparticle Research納米生物的特刊編輯,同時(shí)他也是應(yīng)用光譜學(xué)編委員會(huì)的成員。

 
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