我在分子生物學實驗室工作, 每次講這個都能體會老年人教導年輕人人生經(jīng)驗時候的心情。眼看著年輕人要重蹈覆轍,可就是不聽老夫用血淚換來的人生經(jīng)驗,也罷,年輕人是有資本走彎路的。 下面講講本人總結(jié)的分子生物學實驗五個原則。
原則一:先讀Protocol。
專業(yè)術(shù)語叫做RTFM:Read The Fucking Manual。
商業(yè)化的試劑都有成熟的Protocol,在第一次使用之前,先把自己腦子里關(guān)于這個產(chǎn)品的知識全扔掉,認真讀一次Protocol,注意我說的是認真讀,一字一字讀。按照Protocol說的做,不要相信自己過往的經(jīng)驗。
原則二:設(shè)置盡量多和全面的對照組。
沒有對照的實驗不能得到結(jié)論,做了沒有意義。尤其是出錯的時候,如果沒有對照組,是不可能找到原因的,因為變量太多了,關(guān)于這一點,后面會詳細講講。
原則三:試劑別公用。
不要和別人公用試劑,而是分裝成小份分給每個人,分給自己的就不要讓別人用,分給別人的自己就不要用。尤其是在人多擁擠的實驗室。
另外只有自己用的試劑也分裝成小份用。
原則四:買貴的東西,省著用。
比買便宜的東西隨便用要更省錢。其實省錢倒是次要的,關(guān)鍵是便宜的東西有隱患。
很多試劑的成本之所以便宜,是因為缺少了生產(chǎn)過程的質(zhì)量控制(QC)環(huán)節(jié),導致不同批次產(chǎn)品之間性能的不穩(wěn)定性,從而導致實驗結(jié)果的不穩(wěn)定性。實驗結(jié)果的不穩(wěn)定對于辛辛苦苦做實驗想發(fā)文章的研究生來說是災(zāi)難性的。
原則五:在整個流程中設(shè)置關(guān)鍵的檢查點,檢查點沒有通過之前不要進行后續(xù)的實驗。
除非你對通過這個檢查點非常有信心,否則不要著急。這種趕進度經(jīng)常會讓實驗更慢。
講完了五個原則, 講講這背后的邏輯。
其實本質(zhì)上就是因為分子生物學的實驗(也包括很多生物學實驗)要操作的對象是不可見的,一步操作的結(jié)果并不能直接看到,而生物實驗又往往存在非常多的變量。如果不注意一些原則的話,出了問題永遠找不到原因。
所以所有的原則都是盡量減少變量,才能避免失敗,使得到的結(jié)果具有說服力。
生物學是個實驗學科,Protocol其實就是前人總結(jié)的經(jīng)驗,按照這樣的經(jīng)驗做,就能保證實驗方法沒有問題,也就減少了很多可能出現(xiàn)的變量(不確定因素),是為原則一。
原則二是為了在出現(xiàn)問題的時候縮小Debug的范圍,從而減少變量。
原則三是避免別人的操作產(chǎn)生的變量,這種變量永遠沒法控制。
原則四避免了無良商家引入的變量,減小了批次不穩(wěn)定性。
原則五是為了避免可能的變量積累導致的失敗。
類比一下做生物實驗和寫程序。
程序?qū)懲曛笸ǔR膊皇且淮瓮ㄟ^的,經(jīng)常會有Debug的過程。好在Debug的過程中會告訴程序員哪些地方有問題,一共有多少個。并且程序運行一遍的時間通常很短。
對于生物學實驗來說,也需要經(jīng)歷Debug的過程。但是和程序Debug相比就太痛苦了。
首先實驗操作的對象經(jīng)常是無法看到的,只能通過間接的方法檢測到,而且實驗出Bug了永遠不會有什么Debug程序告訴你哪些地方有問題,一共有多少個。出了問題只能自己試。其次實驗周期通常比較長,分子實驗還算好的,3-5天就差不多了,有很多實驗周期是以年計的。
這時候,盡量減少各種奇葩的因素引入的變量就至關(guān)重要了。