1 前言
藥品檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室通常包含理化實(shí)驗(yàn)室和微生物實(shí)驗(yàn)室兩部分；理化實(shí)驗(yàn)室運(yùn)用物理、化學(xué)的方法對生產(chǎn)用的原輔料、包裝材料、中間體及成品等進(jìn)行鑒別、含量測定等分析和檢驗(yàn)，其結(jié)果作為檢品是否符合法定要求和企業(yè)內(nèi)部質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的依據(jù)。微生物實(shí)驗(yàn)室一般具有以下功能：
③ 細(xì)菌內(nèi)毒素檢查、注射劑的不溶性微粒檢查，這類檢查雖不是檢查微生物，但它們對檢查環(huán)境有較高的要求，通常設(shè)在微生物實(shí)驗(yàn)室。
《藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范》[2]要求藥品生產(chǎn)企業(yè)應(yīng)負(fù)責(zé)藥品生產(chǎn)全過程的質(zhì)量管理和檢驗(yàn)，并配備與藥品生產(chǎn)規(guī)模、品種、檢驗(yàn)要求相適應(yīng)的人員、場所、儀器、設(shè)備。在進(jìn)行微生物實(shí)驗(yàn)室的設(shè)計(jì)時(shí)，應(yīng)了解檢驗(yàn)流程、過程性質(zhì)、有關(guān)標(biāo)準(zhǔn)規(guī)范的規(guī)定等，結(jié)合藥品生產(chǎn)企業(yè)生產(chǎn)品種、檢驗(yàn)工作量的大小合理布置相應(yīng)的微生物檢驗(yàn)功能間。在藥品的微生物學(xué)檢驗(yàn)中，為了保證檢測結(jié)果的準(zhǔn)確、可靠，針對微生物學(xué)檢驗(yàn)產(chǎn)生影響的幾種因素需要采取相應(yīng)的措施，通常為以下幾種：① 藥品本身的抑菌性或藥品中防腐劑的抑菌性。它們會(huì)掩蓋無菌藥品已受污染的事實(shí)或造成低于實(shí)際污染水平的菌檢結(jié)果。通常采用生長比較法，在實(shí)際檢驗(yàn)條件下，通過比較對照接種試驗(yàn)菌或陽性菌在有無供試品的狀態(tài)下的生長情況，來驗(yàn)證供試品在該檢驗(yàn)方法下的抑菌性。② 標(biāo)準(zhǔn)菌種（試驗(yàn)菌或陽性菌）制備與傳代、種類及生長狀態(tài)需符合現(xiàn)行《中國藥典》要求。③ 培養(yǎng)基的促菌生長能力：培養(yǎng)基應(yīng)具備廣譜性，有助于檢品中所有存活微生物的生長。通過接種不同試驗(yàn)菌并觀察它們的生長狀態(tài)，進(jìn)行培養(yǎng)基靈敏度驗(yàn)證試驗(yàn)。④ 檢驗(yàn)器具，如過濾系統(tǒng)的濾器、濾膜性質(zhì)、材質(zhì)等性能，淋洗液、稀釋劑、培養(yǎng)基的無菌性及操作程序等，通常進(jìn)行陰性對照試驗(yàn)來檢驗(yàn)其影響。
⑤ 培養(yǎng)條件（溫度、濕度及需氧或厭氧）及檢測環(huán)境應(yīng)符合相關(guān)要求。
2.1.1 用途用于檢查藥典要求無菌的藥品、醫(yī)療器具、原料、輔料及其他品種是否無菌。2.1.2 《中國藥典》對無菌檢查實(shí)驗(yàn)室要求
無菌檢查應(yīng)在環(huán)境潔凈度10 000級(jí)下的局部潔凈度100級(jí)的單向流空氣區(qū)域內(nèi)或隔離系統(tǒng)中進(jìn)行，其全過程必須嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作，防止微生物污染。單向流空氣區(qū)、工作臺(tái)面及環(huán)境應(yīng)定期按《醫(yī)藥工業(yè)潔凈室（區(qū)）懸浮粒子、浮游菌和沉降菌的測試方法》的現(xiàn)行國家標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行潔凈度驗(yàn)證。隔離系統(tǒng)按相關(guān)的要求進(jìn)行驗(yàn)證，其內(nèi)部環(huán)境的潔凈度須符合無菌檢查的要求。
2.2.1 用途用于檢查非規(guī)定滅菌制劑及其原料、輔料受微生物污染的程度。檢查項(xiàng)目包括細(xì)菌數(shù)、霉菌數(shù)、酵母菌數(shù)及控制菌檢查。2.2.2 《中國藥典》對微生物限度檢查實(shí)驗(yàn)室的要求
微生物限度檢查應(yīng)在環(huán)境潔凈度10 000級(jí)下的局部潔凈度100級(jí)的單向流空氣區(qū)域內(nèi)進(jìn)行。檢驗(yàn)全過程必須嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作，防止再污染。單向流空氣區(qū)域、工作臺(tái)面及環(huán)境應(yīng)定期按《醫(yī)藥工業(yè)潔凈室（區(qū)）懸浮粒子、浮游菌和沉降菌的測試方法》的現(xiàn)行國家標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行潔凈度驗(yàn)證。
2.3.1 用途在適宜條件下，根據(jù)量反應(yīng)平行線原理設(shè)計(jì)，通過檢測抗生素對微生物的抑制作用，計(jì)算抗生素活性（效價(jià)）。2.3.2 《中國藥典》[1]對抗生素效價(jià)的微生物檢定室的環(huán)境潔凈度未有明確規(guī)定要求在國家食品藥品監(jiān)督管理局2000年9月頒發(fā)的《藥品檢驗(yàn)所實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量管理規(guī)范（試行）》中第十八條中規(guī)定有“抗生素微生物檢定實(shí)驗(yàn)室分為半無菌操作間和緩沖間。半無菌操作間設(shè)有紫外線燈，操作臺(tái)宜穩(wěn)固，并保持水平。實(shí)驗(yàn)室內(nèi)應(yīng)光線明亮，并有控制溫度、濕度的設(shè)備”。通常按潔凈度100 000級(jí)設(shè)計(jì)。
抗生素效價(jià)的微生物檢定實(shí)驗(yàn)所用燒杯、漏斗、移液管、容量瓶、滴管、小鋼管等器皿應(yīng)與其他器皿分開洗滌，檢定用平板與其他培養(yǎng)基平板也應(yīng)分開洗滌，防止抗生素對其他微生物培養(yǎng)的污染。
2.4.1 用途利用鱟試劑來檢測或量化由革蘭陰性菌產(chǎn)生的細(xì)菌內(nèi)毒素，以判斷供試品中細(xì)菌內(nèi)毒素的限量是否符合規(guī)定。適用于某些不能用家兔進(jìn)行熱原檢測的品種，如放射性藥劑腫瘤抑制劑等，因?yàn)檫@些制劑具有細(xì)胞毒性而有一定的生物效應(yīng)。目前一般認(rèn)為特別適用于生產(chǎn)過程中的熱原控制，因?yàn)樵摍z查法操作簡單，實(shí)驗(yàn)費(fèi)用少，結(jié)果迅速可得。但該檢查法對革蘭陰性菌以外的內(nèi)毒素不夠敏感，故尚不能代替家兔熱原法。
2.4.2 《中國藥典》中要求
進(jìn)行細(xì)菌內(nèi)毒素含量測定試驗(yàn)所用的器皿需經(jīng)處理，以去除可能存在的外源性內(nèi)毒素，試驗(yàn)操作過程應(yīng)防止微生物的污染，在清凈環(huán)境中進(jìn)行，在層流工作臺(tái)內(nèi)操作。實(shí)驗(yàn)前，須用肥皂洗手，用75%乙醇（最好用叔丁醇代替乙醇）棉球消毒。但《中國藥典》中未對細(xì)菌內(nèi)毒素檢查用室的環(huán)境潔凈度明確規(guī)定要求。一般來說細(xì)菌內(nèi)毒素檢查用室為半無菌操作間：室內(nèi)設(shè)滅菌紫外燈，潔凈度要求一般為100 000級(jí)。也有一些藥廠為了節(jié)省能耗而將其設(shè)置為一般環(huán)境。
2.5.1 用途在可見異物檢查符合規(guī)定后，用以檢查溶液型靜脈用注射劑中不溶性微粒的大小和數(shù)量。
2.5.2 《中國藥典》[1]要求試驗(yàn)操作環(huán)境應(yīng)不得引入微粒，測定前的操作應(yīng)在層流凈化臺(tái)下進(jìn)行。玻璃儀器和其他所需的用品應(yīng)潔凈無微粒，本法所用微粒檢查用水（或溶劑）使用前須經(jīng)不大于1.0 um的微孔濾膜濾過。
2.5.3 因《中國藥典》要求注射用水須進(jìn)行細(xì)菌內(nèi)毒素檢測，因此溶液型靜脈用注射劑的不溶性微粒檢查可與細(xì)菌內(nèi)毒素檢查用室設(shè)成一間，不用專設(shè)一室，配置相應(yīng)的層流凈化臺(tái)。
3.1 陽性接種室（1）微生物檢驗(yàn)離不開對標(biāo)準(zhǔn)菌種及所檢測的菌種進(jìn)行各種處理，如培養(yǎng)基的靈敏度檢查、無菌檢查及微生物限度檢查方法的驗(yàn)證、陽性對照、抗生素效價(jià)的微生物檢定時(shí)菌種及菌懸液制備、轉(zhuǎn)接種等，這些活動(dòng)要直接處理微生物菌種，在一定條件下，許多種類都是病原菌，因此有關(guān)微生物暴露性操作活動(dòng)盡可能在生物安全柜內(nèi)進(jìn)行。所有染菌物品、培養(yǎng)物均應(yīng)經(jīng)高壓滅菌處理后再清洗。
（2）無菌檢查及微生物限度檢查中陽性對照菌液加入含供試品的培養(yǎng)基的操作，不能在檢測供試品的無菌室或凈化臺(tái)上進(jìn)行，以免污染供試品及操作環(huán)境。可設(shè)置一間陽性接種室進(jìn)行上述操作。以前有的將其設(shè)置為一般環(huán)境；有的根本就未專設(shè)此室?！吨袊幍洹罚?005年版）頒發(fā)后，目前許多人認(rèn)為將其設(shè)置為潔凈度10 000級(jí)，設(shè)置單獨(dú)的人凈、物凈系統(tǒng)。
3.2 無菌室
《中國藥典》要求無菌藥品的無菌性檢查室、非無菌藥品的微生物限度檢查室的環(huán)境潔凈度都為10 000級(jí)（局部潔凈度100級(jí)），通常都稱為無菌室；若某藥廠既生產(chǎn)無菌藥品，也生產(chǎn)非無菌藥品，為防止非無菌藥品供試品對無菌藥品的無菌性檢查的污染，有兩種方式：① 如果同時(shí)進(jìn)行這兩類藥品的檢驗(yàn)，最好將這兩種無菌室分開設(shè)置二套，使用各自的人凈、物凈系統(tǒng)。此種方式無菌室利用率不高。② 通常只設(shè)一套無菌室，分期進(jìn)行這兩類藥品的檢驗(yàn)，合理安排檢驗(yàn)規(guī)程、嚴(yán)格操作并經(jīng)驗(yàn)證，確保不對無菌藥品的無菌性檢查產(chǎn)生污染。
但隔離操作器的性能與操作程序的驗(yàn)證尤為重要，隔離用袖管/手套系統(tǒng)應(yīng)進(jìn)行常規(guī)監(jiān)測，這包括經(jīng)常進(jìn)行必要的檢漏試驗(yàn)。隔離系統(tǒng)的諸多優(yōu)勢如潔凈區(qū)域的隔離化、自動(dòng)化、小型化等將使其成為無菌區(qū)的發(fā)展未來。
用來放置培養(yǎng)各類微生物生長的細(xì)菌培養(yǎng)箱和真菌培養(yǎng)箱。大多數(shù)將其設(shè)置為一般環(huán)境；也有的將其潔凈度設(shè)置為100 000級(jí)。設(shè)計(jì)時(shí)根據(jù)藥廠相關(guān)部門的要求進(jìn)行。
圖1中無菌檢查采用環(huán)境潔凈度10 000級(jí)下的局部潔凈度100級(jí)；圖2中無菌檢查采用環(huán)境潔凈度100 000級(jí)下的無菌隔離系統(tǒng)，對目前需要改造而面積及空調(diào)系統(tǒng)受原有條件限制的微生物實(shí)驗(yàn)室來說較為適用。微生物實(shí)驗(yàn)室的其他輔助設(shè)施在設(shè)計(jì)時(shí)與理化實(shí)驗(yàn)室一起統(tǒng)籌考慮。
