微生物檢驗

一、微生物實驗室概況

食品微生物實驗室主要負責各類微生物項目的檢測，主要檢測項目有菌落總數(shù)、大腸菌群、霉菌、酵母、乳酸菌、雙歧桿菌、罐頭商業(yè)無菌、致病菌（如沙門氏菌、志賀氏菌、溶血性鏈球菌、金黃色葡萄球菌等）。

 

微生物實驗室由準備室、洗滌室、滅菌室、無菌室、恒溫培養(yǎng)室和普通實驗室六部分組成。這些房間的共同特點是地板和墻壁的質(zhì)地光滑堅硬，儀器和設備的陳設簡潔，便于打掃衛(wèi)生.

二、微生物實驗室功能分區(qū)

（一）準備室

準備室用于配制培養(yǎng)基和樣品處理等。室內(nèi)設有試劑柜、存放器具或材料的專柜、實驗臺、電爐、冰箱和上下水道、電源等。

 

（二）洗滌室

洗滌室用于洗刷器皿等。由于使用過的器皿已被微生物污染,有時還會存在病原微生物。因此，在條件允許的情況下，最好設置洗滌室。室內(nèi)應備有加熱器、蒸鍋，洗刷器皿用的盆、桶等,還應有各種瓶刷、去污粉、肥皂、洗衣粉等.

 

（三）滅菌室

滅菌室主要用于培養(yǎng)基的滅菌和各種器具的滅菌，室內(nèi)應備有高壓蒸汽滅菌器、烘箱等滅菌設備及設施.

（四）無菌室

無菌室一般為4 — 5 平方米、高 2。5 米的獨立小房間（與外間隔離）,專辟于微生物實驗室內(nèi)。

無菌室也稱接種室，是系統(tǒng)接種、純化菌種等無菌操作的專用實驗室。在微生物工作中，菌種的接種移植是一項主要操作,這項操作的特點就是要保證菌種純種,防止雜菌的污染。在一般環(huán)境的空氣中,由于存在許多塵埃和雜菌，很易造成污染，對接種工作干擾很大。

1.無菌室的設置

無菌室應根據(jù)既經(jīng)濟又科學的原則來設置。其基本要求有以下幾點：

（1)無菌室應有內(nèi)、外兩間，內(nèi)間是無菌室，外間是緩沖室.房間容積不宜過大,以便于空氣滅菌.最小內(nèi)間面積2×2。5＝5m2，外間面積1×2＝2m2，高以2.5m以下為宜,都應有天花板。

(2)內(nèi)間應當設拉門，以減少空氣的波動，門應設在離工作臺最遠的位置上;外間的門最好也用拉門,要設在距內(nèi)間最遠的位置上.

(3）在分隔內(nèi)間與外間的墻壁或“隔扇”上，應開一個小窗，作接種過程中必要的內(nèi)外傳遞物品的通道，以減少人員進出內(nèi)間的次數(shù),降低污染程度。小窗寬60cm、高40cm、厚30cm，內(nèi)外都掛對拉的窗扇.

（4）無菌室容積小而嚴密，使用一段時間后，室內(nèi)溫度很高，故應設置通氣窗。通氣窗應設在內(nèi)室進門處的頂棚上（即離工作臺最遠的位置），最好為雙層結構，外層為百葉窗，內(nèi)層可用抽板式窗扇。通氣窗可在內(nèi)室使用后、滅菌前開啟，以流通空氣。有條件可安裝恒溫恒濕機.　

2.無菌室內(nèi)設備和用具

(1)無菌室內(nèi)的工作臺,不論是什么材質(zhì)、用途的,都要求表面光滑和臺面水平.

(2)在內(nèi)室和外室各安裝一個紫外燈（多為30W)。內(nèi)室的紫外線燈應安裝在經(jīng)常工作的座位正上方，離地面2m，外室的紫外線燈可安裝在外室中央。

(3)外室應有專用的工作服、鞋、帽、口罩、盛有來蘇兒水的瓷盆和毛巾、手持噴霧器和5%石炭酸溶液等.

(4)內(nèi)室應有酒精燈、常用接種工具、不銹鋼制的刀、剪、鑷子、70%的酒精棉球、工業(yè)酒精、載玻璃片、特種蠟筆、記錄本、鉛筆、標簽紙、膠水、廢物筐等。

3.無菌室的滅菌消毒

(1)薰蒸：這是無菌室徹底滅菌的措施。無菌室使用了較長時間，污染比較嚴重時，應進行薰蒸滅菌.可用甲醛、乳酸或硫磺薰蒸。

(2）噴霧：在每次使用無菌室前進行。噴霧可促使空氣中微粒及微生物沉降，防止桌面、地面上的微塵飛場，并有殺菌作用.可用5％石炭酸噴霧。

(3)紫外線照射：在每次使用無菌室前進行.紫外線有較好的殺菌效果。通常應開啟紫外線燈照射30～60min。

4.無菌室工作規(guī)程

(1)無菌室滅菌.每次使用前開啟紫外線燈照射30min以上，或在使用前30min，對內(nèi)外室用5％石炭酸噴霧。

(2)用肥皂洗手后,把所需器材搬入外室；在外室換上已滅菌的工作服、工作帽和工作鞋，戴好口罩，然后用2%煤酚皂液將手浸洗2分鐘.

(3)將各種需用物品搬進內(nèi)室清點、就位，用5%石炭酸在工作臺面上方和操作員站位空間噴霧，返回外室,5～10min后再進內(nèi)室工作。

(4)接種操作前，用70％酒精棉球擦手;進行無菌操作時，動作要輕緩,盡量減少空氣波動和地面揚塵。

(5)工作中應注意安全。如遇棉塞著火，用手緊握或用濕布包裹熄滅，切勿用嘴吹，以免擴大燃燒;如遇有菌培養(yǎng)物灑落或打碎有菌容器時，應用浸潤5%石炭酸的抹布包裹后，并用浸潤5%石炭酸的抹布擦拭臺面或地面，用酒精棉球擦手后再繼續(xù)操作。

(6)工作結束，立即將臺面收拾干凈,將不應在無菌室存放的物品和廢棄物全部拿出無菌室后，對無菌室用5%石炭酸噴霧,或開紫外線燈照射30min.　

（五）恒溫培養(yǎng)室

1.培養(yǎng)室的設置

(1)培養(yǎng)室應有內(nèi)、外兩間,內(nèi)室是培養(yǎng)室，外室是緩沖室。房間容積不宜大,以利于空氣滅菌，內(nèi)室面積在3。2×4.4＝14m2左右,外室面積在3.2×1。8＝6m2左右，高以2。5m左右為宜，都應有天花板。

(2)分隔內(nèi)室與外室的墻壁上部應設帶空氣過濾裝置的通風口。

(3)為滿足微生物對溫度的需要，需安裝恒溫恒濕機。

(4)內(nèi)外室都應在室中央安裝紫外線燈，以供滅菌用。

2.培養(yǎng)室內(nèi)設備及用具

(1)內(nèi)室通常配備培養(yǎng)架和搖瓶機(搖床）。常用的搖瓶機有旋轉式、往復式兩種.

(2)外室應有專用的工作服、鞋、帽、口罩、手持噴霧器和5％石炭酸溶液、70％酒精棉球等.

3.培養(yǎng)室的滅菌、消毒

同無菌室的滅菌、消毒措施。小規(guī)模的培養(yǎng)可不啟用恒溫培養(yǎng)室，而在恒溫培養(yǎng)箱中進行。

(六)普通實驗室

進行微生物的觀察、計數(shù)和生理生化測定工作的場所。室內(nèi)的陳設因工作側重點不同而有很大的差異.一般均配備實驗臺、顯微鏡、柜子及凳子。實驗臺要求平整、光滑，實驗柜要足以容納日常使用的用具及藥品等。 

(七)更衣室

是進入無菌室之前工作人員進行更衣、洗手的地方.室內(nèi)設置無菌室及緩沖室的電源控制開關和放置無菌操作時穿的工作服、鞋、帽子、口罩等。

 

(八)辦公室

登記待檢驗樣品；出檢測報告；處理有關文件資料;放松休息等

理化試驗室設計方案

一、主要檢測項目

蛋白、水分、灰分、鈣、磷、鹽、微生物、礦物質(zhì)、藥殘等。在功能上又涉及到排水、通風、排風、供電、空調(diào)、消防、廢氣、廢液處理等復雜的工藝技術,同時還要考慮到環(huán)保、安全、可持續(xù)性發(fā)展等諸多因素，因此是一個復雜的系統(tǒng)工程。

二、設計要求

1.環(huán)境要求

1.1通風

實驗室經(jīng)常由于實驗時間長,人員多和實驗過程中產(chǎn)生一些有害氣體，造成空氣污濁，對人體不利。為了防止實驗室工作人員吸入或咽入一些有有毒的、可致病的或毒性不明的化學物質(zhì)和有機氣體，實驗室中應有良好的通風,必要時應設空調(diào).通風設備有：通風柜、通風罩或局部通風裝置.除了樓主提到的外,需要注意有機溶劑 前處理和使用電爐進行前處理的通風柜應分別布置在不同的實驗室，局部排風裝置和排風罩必須具有足夠的功率，否則實際工作中難以滿足使用要求.

1.2濕度和溫度

實驗室要求適宜的溫度和濕度。室內(nèi)的小氣候，包括氣溫、濕度和氣流速度等，對在實驗室工作的人員和儀器設備有影響。夏季的適宜溫度應是18-28℃，冬季 為16—20℃，濕度最好在30％(冬季）—70％(夏季)之間。除了特殊實驗室外,溫濕度對大多數(shù)理化實驗影響不大，但是天平室和精密儀器室應根據(jù)需要 對溫濕度進行控制.

1.3潔凈度

經(jīng)常保持實驗室的清潔是非常重要的。室外大氣中的塵埃，借通風換氣過程會進入實驗室，實驗內(nèi)含塵量過高，空氣不凈，不但影響檢測結果，而且，其微粒落在儀 器設備的元件表面上，可能構成障礙,甚至造成短路或其他潛在危險。潔凈實驗室是要花銀子的，建議不是特殊需要可不進行潔凈實驗室設計，若有需要可以對大型 精密儀器室、特殊實驗室進行設計，一般達到萬級凈化要求即可。若有多個潔凈實驗室,送排風系統(tǒng)應各自獨立設計,獨立使用.

2.設施要求

2.1供水與排水、排污

實驗室都應有供排水裝置,排水裝置最好用聚氯乙烯管,接口用焊槍焊接?；瘜W檢驗實驗臺有可能都應安裝水管、水龍頭、水槽、緊急沖淋器、洗眼器等,一般實驗 室的廢水無須處理就可排入城市下水網(wǎng)道,而實驗室的廢水必須凈化處理后才能排入下水網(wǎng)道?，F(xiàn)代化的實驗室都應建設配套的污水處理站，一般實驗室的廢水 無須處理就可排入污水處理站進行處理，對高濃度的酸堿廢水應先中和再排入污水處理站，對此類廢水的排放建議采用耐酸減的排水管道,從實驗室直接排放到處理 站，對大量使用有機溶劑的實驗室應安裝耐有機溶劑的排水管道,例如可采用鑄鐵管接入污水處理站，也就是說,實驗室應根據(jù)不同功能，采用不同材料的排水管 道，分別設計相互之間不交叉，分別排放到污水處理站。實驗室的廢水必須凈化處理后才能排入下水網(wǎng)道。實驗室的供水有自來水和實驗用純水，除了自來水, 建議安裝純水處理裝置，保障實驗室用水，并且再相關實驗室純水終端加裝超純水處理裝置，滿足精密儀器使用要求.

2.2供電

電力是實驗室重要動力。為保障實驗室的正常工作,電源的質(zhì)量、安全可靠性及連續(xù)性必需保證。一般用電和實驗用電必須分開；對一些精密、貴重儀器設備，要求 提供穩(wěn)壓、恒流、穩(wěn)頻、抗干擾的電源；必要時須建立不中斷供電系統(tǒng),還要配備專用電源,如不間斷電源(UPS)等。

2.3供氣與排氣

實驗室使用的壓縮氣體鋼瓶,應保持最少的數(shù)量，必須牢牢固定，或用金屬鏈栓牢，絕不能靠近火源，直接日曬，高溫房間等溫度可能升高的地方使用。實驗室的廢氣的處理，如量少，可直接排出室外；但排出管必須高出附近房頂3m左右,對毒性較大或數(shù)量多的廢氣,可參考工業(yè)廢氣處理方法如用吸附，吸收，氧化,分解等 方法來處理.如果理化實驗室不是在最高一層，廢氣的排放必須采用專用管道從樓頂排放。

三、功能與布局

1.特性

根據(jù)理化檢驗科實驗室工作的特性，應創(chuàng)造一個安全、舒適、美化的實驗室工作環(huán)境，辦公區(qū)域與實驗區(qū)域分開，即形成非受控區(qū)域和受控區(qū)域.理化實驗室應配置樣品前處理室、理化分析室（精密儀器室）、天平室、留樣室、辦公室等。

2.布局規(guī)劃

2.1樣品前處理室

實驗室必須有排風設施，獨立排氣柜,有機、無機前處理室分開,占用面積不少于30m2/間,墻、地板、實驗臺、排氣柜等要絕緣、耐熱、耐酸堿和耐有機溶劑腐蝕；地面應有地漏,防倒流。設置中央實驗臺的實驗室應設供實驗臺用的上下水裝置、電源插頭。

 

2.2理化分析室

（精密儀器室)色譜室:氣相色譜室，氣質(zhì)聯(lián)用室:可聯(lián)用，以單臺計算面積不小于10m2為宜.液相色譜室,液質(zhì)聯(lián)用儀室：可聯(lián)用，面積不小于20m2/間(以單臺計算)標準化的至少需要3臺液相色譜儀，兩臺共用一個實驗室，至少2個房間離子色譜室可以與液相室聯(lián)用，單獨實驗室房間建議15m2以上。光譜室:建議配置獨立三相380V電源。原子吸收室:獨立排風(外排）通道，上下水。原子熒光室：獨立排風(外排）通道.原子吸收與原子熒光室可聯(lián)用，條件好的可配備ICP-MS室，單獨實驗室房面積建議15m2以上。

2.3天平室

天平室應有雙層玻璃和窗簾,有恒溫恒濕系統(tǒng)，天平臺必須防震，天平臺放置必須離開墻壁1cm，可購置防震型天平臺或磚砌大理石臺面天平臺.建議8m2以上。

2.4小型儀器室

小型儀器室應有足夠的電源插座，最好安裝穩(wěn)壓裝置,配備水池.可存放紫外可見分光光度計,顯微鏡，酸度計等小型儀器。建議15m2以上.

2.5留樣室

存放樣品柜、工作臺。房間面積建議20m2以上.獨立的樣品存儲室，存儲柜功能區(qū)間應劃分清楚，標明未檢樣品、在檢樣品和已檢樣品。樣品室必須干燥、通風、防塵、防鼠。

2.6辦公室

作為實驗室管理及數(shù)據(jù)報告填寫等工作要求，具體根據(jù)實驗室人員設定。建議20m2以上.獨立的樣品存儲室，存儲柜功能區(qū)間應劃分清楚,標明未檢樣品、在檢樣品和已檢樣品。樣品室必須干燥、通風、防塵、防鼠。

四、常用設備

水分、含鹽量、含糖量、蛋白含量、脂肪含量、纖維含量、維生素含量、酸度等。對于這些項目的檢測，如果經(jīng)費有限，都可以采用化學法分析，只需配置最簡單的烘箱、水浴、電爐、攪拌器、粉碎機、pH計等設備即可。紫外/可見分光光度計、近紅外分析儀、自動滴定儀等。檢測維生素A、E等有時還需配置熒光光度計。檢測營養(yǎng)元素，如鈣、鋅、鐵等，可購置原子吸收儀-火焰檢測器。

a)微生物

建微生物實驗室要按照生物實驗室規(guī)范標準要求進行布局。必要的設備有潔凈臺、培養(yǎng)箱、高壓滅菌鍋、電爐等，其它設備則根據(jù)具體檢測項目配置。經(jīng)費少可以買國產(chǎn)的，經(jīng)費多可以考慮買進口的，兩者的價錢相差很多.

b)添加劑和有害元素

有一部分項目可以用化學法,如亞硝酸鹽、二氧化硫、重金屬含量、總砷等。但要想滿足現(xiàn)在國標的食品衛(wèi)生要求,應該購置氣相色譜-氫火焰檢測器、液相色譜—紫外/可見光檢測器，這樣一般的防腐劑（苯甲酸、山梨酸等）、甜味劑（甜蜜素、糖精鈉等）、色素(檸檬黃、胭脂紅等）都可以檢測了。購置原子吸收儀—石墨爐檢測器,可以分別檢測鉛、鉻、鎘、銅、鎳等有害元素,還需要一臺原子熒光儀，用來檢測砷和汞等。

c)殘留農(nóng)藥

檢測殘留農(nóng)藥氣相色譜是不能少的。檢測有機氯農(nóng)藥,需配電子俘獲ECD檢測器；檢測有機磷農(nóng)藥，需配火焰光度FPD檢測器或氮磷NPD檢測器?，F(xiàn)在農(nóng)殘檢測的項目越來越多，為提高通用性，建議配置毛細管柱分流/不分流進樣口,安裝毛細管色譜柱。與傳統(tǒng)填充柱色譜柱相比，毛細管柱分析項目多，分離度好,可以減少頻繁的更換色譜柱，提高分析效率。出口食品加工企業(yè)生產(chǎn)的產(chǎn)品在出口時需檢測的農(nóng)殘項目越來越多，為了把好生產(chǎn)原料和產(chǎn)品質(zhì)量關，可以配置氣相色譜—質(zhì)譜儀。一般只需配置電子轟擊EI源，如果有必要可再配一個負化學NCI源.是選擇四極質(zhì)譜還是離子阱質(zhì)譜，個人認為都可以，兩種儀器各有優(yōu)缺點.還是要看具體工作。

d)殘留獸藥

若進行殘留獸藥的檢測，項目不多且批次多，可以考慮配置酶聯(lián)免疫儀,該儀器一次投入不大，操作簡便，檢測靈敏度高。采用ELISA也有一些缺點，一是試劑盒為長期的消耗品,若檢測的批次少成本會較高，二是特異性不好，可能會有假陽性，三是如果在相對長的一段時間內(nèi)檢測項目較多，成本甚至比儀器分析還高。對于有一定規(guī)模的出口食品企業(yè)，為適應當前歐盟、美國、日本等發(fā)達國家檢測限量要求，最好配置一臺液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀。第一臺儀器建議配置三重四極質(zhì)譜儀，靈敏度高、重現(xiàn)性好。儀器不一定要追求高配置，夠用就行，但靈敏度、穩(wěn)定性、抗污染等性能要好。