骨髓間充質(zhì)干細胞是多能干細胞。因此,作為再生醫(yī)學的細胞來源,它是活性研究和臨床應(yīng)用的目標。當骨髓液或骨髓細胞接種在培養(yǎng)皿上時,間充質(zhì)干細胞會作為粘附細胞增殖。因此,間充質(zhì)干細胞可以從漂浮的血細胞中分離出來。在此,我們報告了使用inktype="2" hasload="1" imgdata="null" imgurl="" linktype="text" tab="innerlink" target="_blank" textvalue="奧林巴斯Provi™ CM20培養(yǎng)監(jiān)測系統(tǒng)" rel="nofollow" style="margin: 0px; padding: 0px; color: var(--weui-link); text-decoration-line: none; word-break: break-all; outline: 0px; -webkit-tap-highlight-color: rgba(0, 0, 0, 0); cursor: pointer; max-width: 100%; overflow-wrap: break-word !important; box-sizing: border-box !important;">奧林巴斯Provi™ CM20培養(yǎng)監(jiān)測系統(tǒng)對間充質(zhì)干細胞原代培養(yǎng)的遠程監(jiān)測結(jié)果。
實驗過程
使用補充了10%胎牛血清(FBS)和1%青霉素鏈霉素的Iscove改良Dulbecco培養(yǎng)基(IMDM),將市售人骨髓細胞以950,000個細胞/0.5ml/孔的密度接種在24孔板(Sumitomo Bakelite,目錄號MS-80240)上。使用CM20系統(tǒng)每小時對細胞進行一次自動聚焦成像。由于在培養(yǎng)的第4天觀察到粘附細胞的增殖,因此在更換培養(yǎng)基后對其進行長達6天的監(jiān)測。
實驗結(jié)果
大多數(shù)細胞是血細胞,接種后未立即觀察到間充質(zhì)干細胞。然而,在接種后第4天,出現(xiàn)了具有紡錘體形態(tài)的間充質(zhì)干細胞。隨后,更換培養(yǎng)基以去除血細胞。接種后第6天,發(fā)現(xiàn)間充質(zhì)干細胞增殖為大量細胞。
使用培養(yǎng)監(jiān)測系統(tǒng)評估的優(yōu)勢
骨髓間充質(zhì)干細胞的原代培養(yǎng)應(yīng)盡可能溫和進行,直到出現(xiàn)粘附細胞。應(yīng)盡可能避免在顯微鏡觀察或更換培養(yǎng)基過程中發(fā)生晃動。在這里,我們展示了用CM20系統(tǒng)遠程監(jiān)控培養(yǎng)中的細胞的過程。通過使用CM20系統(tǒng),我們縮短了操作時間,并可以在適當?shù)臅r間繼續(xù)進行其余的試驗。
適于這類應(yīng)用的產(chǎn)品
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CM20
CM20細胞培養(yǎng)監(jiān)控系統(tǒng)可遠程提供細胞培養(yǎng)的量化數(shù)據(jù):只需將CM20監(jiān)控頭和要培養(yǎng)的細胞放入培養(yǎng)箱內(nèi),系統(tǒng)就會定期掃描培養(yǎng)的細胞,計算細胞數(shù)量,并確定融合度。數(shù)據(jù)可以通過無線方式從計算機工作站傳送出來,因此無需進入潔凈間,即可監(jiān)測細胞的生長狀態(tài)。
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CM30