dSTORM Discovery Kit 是由ONI專家團(tuán)隊(duì)在單分子成像與功能分析系統(tǒng)(Nanoimager)上經(jīng)過(guò)數(shù)次實(shí)驗(yàn)和充分驗(yàn)證后發(fā)布的又一款前沿產(chǎn)品,可以為培養(yǎng)細(xì)胞的免疫熒光標(biāo)記提供模塊化的操作指南,您可以在自己的樣本中以20nm的超分辨率和高靈敏度對(duì)細(xì)胞外和細(xì)胞內(nèi)蛋白進(jìn)行檢測(cè),輕松體驗(yàn)專屬于自己的超分辨成像。
整個(gè)實(shí)驗(yàn),您只需提供細(xì)胞和一抗,剩下的交給我們!
使用dSTORM Discovery Kit可以做到:
用自己的一抗標(biāo)記感興趣的目標(biāo)。
使用結(jié)合高特異性dSTORM熒光基團(tuán)的抗小鼠、兔和大鼠二抗。
優(yōu)化樣本制備的關(guān)鍵步驟,如固定,以保護(hù)生物結(jié)構(gòu)并避免偽影。
對(duì)多種類型的細(xì)胞進(jìn)行雙色超分辨率dSTORM成像。
使用Nanoimager獲得20nm分辨率的圖像。
使用ONI的CODI平臺(tái)進(jìn)行基于聚類的數(shù)據(jù)分析,獲得納米級(jí)細(xì)胞信息。
dSTORM Discovery Kit優(yōu)勢(shì)
一、1個(gè)試劑盒支持50個(gè)樣本檢測(cè)
為每個(gè)檢測(cè)樣品提供100µL。方案在未包被和包被聚賴氨酸的表面上已得到驗(yàn)證。
二、優(yōu)化靶標(biāo)的固定和標(biāo)記方法
使用dSTORM Discovery Kit或dSTORM Discovery Kit with Strong Fixative在一系列細(xì)胞系中固定和標(biāo)記您感興趣的細(xì)胞內(nèi)或細(xì)胞外靶標(biāo)。
三、選取用于雙色成像的二級(jí)探針
dSTORM Discovery Kit提供了三種不同的二抗,您可以從中選擇兩種與CF583R或AZ647進(jìn)行二級(jí)偶聯(lián)。
四、使用Nanoimager進(jìn)行dSTORM成像
可以使用ONI的Nanoimager對(duì)染色的細(xì)胞靶標(biāo)包括低水平表達(dá)的靶標(biāo)進(jìn)行檢測(cè),并對(duì)CF583R和AZ647二抗染色的靶標(biāo)進(jìn)行同時(shí)或連續(xù)成像。
五、利用CODI平臺(tái)分析dSTORM
使用包含Clustering和counting等工具的CODI分析平臺(tái),可以從染色的結(jié)構(gòu)中提取納米級(jí)形態(tài)信息及評(píng)估細(xì)胞中的蛋白質(zhì)分布。
兩個(gè)規(guī)格可以選擇
本次新發(fā)布的dSTORM Discovery Kit有兩種規(guī)格可以選擇:dSTORM Discovery Kit和dSTORM Discovery Kit with Strong Fixative。您可以根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求靈活選擇合適的試劑盒,優(yōu)化樣品制備步驟,在自己的樣品中標(biāo)記感興趣的目標(biāo)。
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dSTORM Discovery Kit
細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)試劑盒
dSTORM Discovery Kit可指導(dǎo)您借助ONI優(yōu)化的試劑和方案為dSTORM成像準(zhǔn)備細(xì)胞,因此您可以節(jié)省大量時(shí)間,并以快速簡(jiǎn)潔的方式獲取穩(wěn)健的超分辨率數(shù)據(jù)。我們建議研究細(xì)胞內(nèi)非膜蛋白的研究人員使用該試劑盒。如果研究結(jié)構(gòu)蛋白,如微管蛋白和肌動(dòng)蛋白,我們推薦選擇另一款試劑盒——dSTORM Discovery Kit with Strong Fixative,因?yàn)樗峁┝烁鼜?qiáng)的固定劑可以保證達(dá)到理想的固定效果。
dSTORM Discovery Kit中包含:PFA固定液、封閉液、標(biāo)記CF583R和AZ647的二抗(大鼠、小鼠或兔源)、dSTORM成像試劑和綜合操作指南。
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dSTORM Discovery Kit with Strong Fixative
膜和結(jié)構(gòu)蛋白檢測(cè)試劑盒
PFA不足以交聯(lián)許多保持流動(dòng)性的膜蛋白,這可能會(huì)導(dǎo)致抗體誘導(dǎo)的蛋白質(zhì)聚集。因此dSTORM Discovery Kit with Strong Fixative在dSTORM Discovery Kit的基礎(chǔ)上做了優(yōu)化,使用PFA和戊二醛的組合固定膜蛋白,這種強(qiáng)大的固定劑可以更好地保留天然結(jié)構(gòu),讓您能夠可靠地測(cè)量膜蛋白聚集。由于戊二醛會(huì)破壞一些表位,該試劑盒提供了兩種固定劑,您可以根據(jù)自己的目標(biāo)蛋白選擇合適的固定劑。
dSTORM Discovery Kit with Strong Fixative中包含:PFA固定液及GA強(qiáng)力固定補(bǔ)充液、自發(fā)熒光淬滅劑、標(biāo)記CF583R和AZ647的二抗(大鼠、小鼠或兔源)、優(yōu)化的封閉液和穿透液、dSTORM成像試劑及綜合操作指南。
dSTORM成像數(shù)據(jù)展示
ONI的專家團(tuán)隊(duì)使用dSTORM Discovery Kit在一系列細(xì)胞類型中對(duì)一系列蛋白靶標(biāo)進(jìn)行了充分測(cè)試和驗(yàn)證,因此您可以放心使用這款新產(chǎn)品。這些細(xì)胞類型包括人類癌癥細(xì)胞系、原代神經(jīng)元、T細(xì)胞和小鼠細(xì)胞系等,一系列蛋白質(zhì)靶標(biāo)包括細(xì)胞內(nèi)細(xì)胞器(線粒體早期和晚期內(nèi)涵體、溶酶體)、結(jié)構(gòu)蛋白(微管蛋白)、核蛋白(組蛋白、核纖層)、表面受體(包括低表達(dá)的受體:CD3、CD28、PD1)等。
細(xì)胞核和線粒體雙色dSTORM成像
Histone H3K27ac (cyan) and mitochondria TOMM20 (gold) labeled with anti-rabbit CF583R and anti-mouse AF647 in U2OS cells.
溶酶體dSTORM成像
Lysosomal LAMP-1 (magenta) and endosomal CD63 (green) labeled with anti-rabbit CF583R and anti-mouse AZ647 in U2OS cells.
線粒體dSTORM成像
Mitochondrial TIMM44 (magenta) and TOMM20 (green) labeled with anti-mouse CF583R and anti-rabbit AZ647 in U2OS cells. Zoomed images highlight the power of dSTORM to distinct the two membranes at nanoscale level.
原代T細(xì)胞中PD-1dSTORM成像
PD-1 labeled with anti-mouse AZ647 (cyan) in primary T cells.
溶酶體和微管蛋白dSTORM成像
Lysosomal LAMP-1 (magenta) and tubulin (yellow) labeled with anti-rabbit CF583R and anti-rat AZ647 in U2OS cells.
神經(jīng)突觸 dSTORM成像
Neuronal synaptic markers Bassoon (magenta) and Homer-1 (cyan) labeled with anti-mouse AZ647 and anti-rabbit CF583R (cyan) in primary rat cortical neurons.